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来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-11-27 17:24 标签： 阿齐霉素
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HPLC法测定阿齐霉素的含量
来源：中国色谱网 作者：关倩明李子熊张秋莲
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摘要: 0的磷酸二氢钾-乙腈(70∶30)为流动相，检测波长210nm，测定阿齐霉素的含量。在160～2000 μg/mL范围内，浓度与峰面积线性关系良好(r=0。阿齐霉素的平均回收率为100。关键词：阿齐霉素高效液相色谱法阿齐霉素(Azithromycin)是具有15元的氮杂内酯(azalatone)环的半合成大环内酯抗生素［1］。...
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(广州市药品所　510160)
　　摘要　　采用高效液相色谱法，C18柱，以pH 4.0的磷酸二氢钾-乙腈(70∶30)为流动相，检测波长210
nm，测定阿齐霉素的含量。在160～2000 μg/mL范围内，浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9999)。阿齐霉素的平均回收率为100.8
％，精密度RSD为0.9 %(n=6),方法简便、准确。
关键词：阿齐霉素　高效液相色谱法　　阿齐霉素(Azithromycin)是具有15元的氮杂内酯(azalatone)环的半合成大环内酯抗生素［1］。化学结构上系在红霉素A酯环的9α位内插1个含有取代甲基的氮原子，经修饰后成为新一代的大环内酯类抗生素。阿齐霉素在酸性环境中有较高的稳定性，具有吸收好、生物利用度高、半衰期长、感染部位组织及细胞浓度高、能向病灶定向转运、毒性低及耐受性好等优点［2］，美国药典中阿齐霉素的含量测定方法是采用反相氧化铝柱,安培电化学检测器［3］,而我国部标准也收载了用pH
9的流动相,但上述这些条件在一般的实验室中都较难满足。本文探讨了用普通的C18柱，pH 4.0的0.067 mol/L的磷酸二氢钾―乙腈(70∶30)为流动相，柱温50
℃测定阿齐霉素的含量，能得到较好的分离效果，方法简单、方便，线性关系和重现性好，结果准确。1　仪器、试药、色谱条件
1.1　仪器　岛津LC-6A液相色谱仪，SPD-6AV紫外检测器，GO-ZAS柱温箱，C-3A积分仪。
1.2　试药　阿齐霉素胶囊(美国Pfizer公司生产)，阿齐霉素对照品(美国Pfizer公司提供，纯度为94.3
%),乙腈及磷酸二氢钾均为分析纯。
1.3　色谱条件　C18柱(大连物化所)，μ-Bondapak，10 μm,流动相为pH 4.0的0.067
mol/L的磷酸二氢钾－乙腈(70∶30)，流速1.2 mL/min，柱温50 ℃。
2　实验条件的选择
2.1　流动相配比对色谱分离的影响　分别配制乙腈比例为20
％、25 ％、30 ％、35 ％、40 ％的流动相，考察流动相配比对测定的影响。结果表明，乙腈的比例增大，保留体积减少，但当乙腈比例超过35
％时，主峰与辅料及酸降解物峰不能完全分离，比例少于25 ％时，主峰峰形变钝，有明显拖尾现象，柱效较差。故采用30
％的乙腈配比较为适宜。在50 ℃柱温时理论塔板数约为2500。
2.2　流动相pH对测定影响　精密称取相当于阿齐霉素25
mg的样品于25 mL容量瓶中，加乙腈5 mL溶解，再分别加入最终pH为3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0的流动相至刻度，考察不同pH的流动相对色谱的影响。结果表明在流动相pH
3.5～7.0范围内，阿齐霉素主峰保留时间随流动相pH增大而延长，当流动相pH
5.0以上，主峰峰形扩展，有拖尾现象，作者认为这是阿齐霉素本身的酸碱度对分配层析的影响。流动相pH为4.0出峰适中，理论塔板数高，故本文采用pH为4.0的流动相。
2.3　pH对样品稳定性影响　精密称取相当于阿齐霉素100
mg的样品于100 mL容量瓶中，加入乙腈20 mL，超声振荡，加入流动相至刻度，摇匀，滤过。把样品溶液分成4份，分别用10
％磷酸或1 mol/L的氢氧化钠调pH至4.0、5.0、6.0、7.0，定时进样，结果在6
h内，各pH的样品液的峰面积均基本不变，未见有明显降解。pH=4.0时，一般日内操作时间6
h内峰面积的RSD=0.7 ％,重现性较好。
3　方法与结果
3.1　精密度试验　分别取相当于阿齐霉素50
mg的样品于50 mL容量瓶中,加入乙腈5 mL溶解,再加流动相至刻度,滤过,分别取滤液进样,结果6份样品的RSD=0.9
3.2　线性回归试验　精密称取阿齐霉素对照品100
mg置50 mL容量瓶中，以乙腈5 mL溶解，加流动相至刻度，摇匀，得浓度为2000
μg/mL的对照品贮备液，分别吸取一定量，加入流动相稀释成浓度为160～2000
μg/mL的一系列溶液，分别各自进样。以阿齐霉素溶液的浓度对峰面积作线性回归，得回归方程(n=9)：
y=-512.15+51.83x　r=0.9999
3.3　加样回收试验　分别精密称取对照品10
mg于25 mL容量瓶中， 加乙腈5 mL溶解，然后加入经滤过的样品液(4000
μg/mL)5 mL，加流动相至刻度，混匀后，进样，测定阿齐霉素的含量，除去样品的本底，计算回收率，测得阿齐霉素的平均回收率为100.8
％,RSD=0.47 ％,n=4。
3.4　样品含量测定　取3批阿齐霉素胶囊装量差异项下的内容物，混合均匀，分别精密称取相当于阿齐霉素80
mg的样品于100 mL容量瓶中，加入乙腈5 mL，超声振荡，加流动相至刻度，摇匀后滤过，取滤液进样。3批样品含量测定结果见表1，同时与效价测定法比较，结果基本一致。
4.1　阿齐霉素为大环内酯类抗生素，紫外吸收较弱，取其末端吸收210
nm波长处测定，得到一定的响应值。柱温较低时峰形拖尾，在50 ℃时有明显的改善。选择一定流速时，样品能与辅料及溶剂峰充分分离。表1　两法含量测定结果比较（％）批号本法微生物效价测定法56455F100.398.956434C99.399.7270096101.799.7图1　酸降解物色谱图
1.降解物1(2.7min)　2.阿齐霉素(4.8min)
3.降解物2(6.5min)　4.降解物3(8.0min)4.2　分别用0.1
mol/L盐酸和0.1 mol/L氢氧化钠将阿齐霉素样品溶解，配成浓度为1000 μg/mL的样品溶液，进样前将样品溶液pH调至中性。结果酸降解物峰出峰时间分别为2.7、6.5、8.0
min，主峰出峰为4.8 min(如图1)，而碱降解物大部分均在主峰前出峰，另一降解峰则在样品主峰之后，7.0min
出峰，表明在本流动相系统能有效地将阿齐霉素及其酸、碱降解物基本分离，分离效果显著。4.3　经考察，乙腈及流动相本身对主峰的出峰没有影响，而且本法用于溶出度的检测，同样得到满意的结果。参考文献
1　胡昌勤.Azithromycin及其相关化合物的分析.国外医药抗生素分册,):87
2　陈亦芳.Azithromycin的体外抗菌作用.中国抗生素杂志,):178
3　N-Kovacic-Bosnjak,et al.Reversed-phase HPLC Analysis of the semisynthetic
Macrolide Antibiotic Azithromycin.Chromatographia,):998(本文于日收到)HPLC Determination of AzithromycinGuan Qianming,Li Zixiong and Zhang
Qiulian(Guangzhou Insititute for Drug
Control,Guangzhou，510160)　　Abstract:A HPLC method for the determination of azithromycin has
been established on C18 column,with 0.067 mol/L monobasic potassium phosphate-acetonitrile
pH 4.0(70∶30)as mobile phase,and UV detection at 210 nm.The linear
correlation was observed within the range of 160～2000 μg/mL(r=0.9999).The
average recovery of azithromycin was 100.8 %(n=4),the RSD was 0.9
%(n=6).The method is simple and accurate.　　Key words:azithromycin, HPLC
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乙酰螺旋霉素片的批号是什么意思?
乙酰螺旋霉素片的批号是什么意思?乙酰螺旋霉素片的批号是什么意思?是代表生产时间还是到期时间？这个批次的药过期了？还能吃吗？
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15年7月1曰生产的，看保质期多长时间，如果一年那就别吃了，说明过期了。
24个月说明能吃，到17年7月1日过期，吃吧亲。
采纳率：25%
到期日期，不能吃了
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