查TH1或TH2身体检查需要多少钱钱

求小鼠脾组织的Th1/Th2/Th17/Treg细胞流式检测试剂 - 流式中文网 - Powered by Discuz!
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标题: 求小鼠脾组织的Th1/Th2/Th17/Treg细胞流式检测试剂
作者: olesama001& & 时间:
标题: 求小鼠脾组织的Th1/Th2/Th17/Treg细胞流式检测试剂想做小鼠脾组织的Th1/Th2/Th17/Treg细胞流式检测,目前处于准备购买试剂阶段。
准备购买以下试剂:淋巴细胞分离液,PMA,离子霉素,PMI1640,胎牛血清,
& && &&&Rat antimouse CD3 APC,
& && &&&Rat antimouse CD8 PerCP
& && &&&Rat antimouse IL-17-FITC
& && &&&Rat antimouse IFNγPE
& && &&&Rat antimouse IL-4 PE
& && &&&Rat antimouse Foxp3-PE
& && &&&Rat antimouse CD25-PE
1.有什么错误,遗漏多余的请老师们指出
2.还需要什么同型对照吗?
3.小鼠用&&Rat antimouse抗体行吗?
& && && && && && && && && && && && && && && && &
作者: olesama001& & 时间:
另外用什么公司的抗体比较好?
作者: niwanmao& & 时间:
你们的流式细胞仪是什么配置?
你如果要测Treg,CD25和foxP3不能是同样的荧光。
你如果自己不会选,建议可以参考已发表的相关文献选择。
作者: olesama001& & 时间:
你们的流式细胞仪是什么配置?
你如果要测Treg,CD25和foxP3不能是同样的荧光。
倪老师,我周末去咨询了一下,我们的流式细胞仪是4通道的 APC,PE, PerCP,FITC。先检测TH1,TH2把CD3,CD8, IFNγ和 IL-4每种加一种染色剂,那检测TH17,IL-17是否就必须另一管检测了。另外Treg细胞液单独一管,CD3,CD8,CD25,foxp3每种加一种染色剂对吗。另外哪种因子加哪种染色剂是比较固定的吗,还是说只要染色剂不同就可以?
作者: olesama001& & 时间:
你们的流式细胞仪是什么配置?
你如果要测Treg,CD25和foxP3不能是同样的荧光。
PE-cy7与PE可以同时加吗,都在一个通道
作者: olesama001& & 时间:
吧里张明霞老师的PPT里说 可以用 IL-17-FITC, IFNγPE, IL-4 PE,检测TH1和TH2细胞, IFNγ和 IL-4 可以用一样的染色剂吗,是不是应该是 IL-17-PE, IFNγFITC, IL-4 PE
作者: niwanmao& & 时间:
倪老师,我周末去咨询了一下,我们的流式细胞仪是4通道的 APC,PE, PerCP,FITC。先检测TH1,TH2把CD3,CD8 ...
可以这样搭配,供参考:
Th1/Th2:CD3 FITC、CD8 PerCP、IFNγ APC、IL-4 PE
Th17: CD3 FITC、CD8 PerCP、IL-17 PE
Treg: CD3 FITC、CD8 PerCP、CD25 APC、foxp3 PE
作者: olesama001& & 时间:
可以这样搭配,供参考:
Th1/Th2:CD3 FITC、CD8 PerCP、IFNγ APC、IL-4 PE
谢谢倪老师
作者: 呓er& & 时间:
我做过小鼠脾脏的TH1 TH2 TH17 除了佛波酯 其他都是在eBioscience买的 做出来还不错 荧光用的 直接做的CD4和胞内因子的双标 没敢标太多 这个操作卡时间点卡的非常严格 稍有不慎就失败了
作者: v2002lichao& & 时间:
我做过小鼠脾脏的TH1 TH2 TH17 除了佛波酯 其他都是在eBioscience买的 做出来还不错 荧光用的 直接做的CD4 ...
双标如何做的Treg?
作者: 呓er& & 时间:
双标如何做的Treg?
Treg双标肯定不能做的啊
作者: olesama001& & 时间:
我做过小鼠脾脏的TH1 TH2 TH17 除了佛波酯 其他都是在eBioscience买的 做出来还不错 荧光用的 直接做的CD4 ...
用CD4就不需要CD8了,但CD3也不用吗,细胞内使用IFNγ、IL-4,IL-17 吗。
作者: olesama001& & 时间:
可以这样搭配,供参考:
Th1/Th2:CD3 FITC、CD8 PerCP、IFNγ APC、IL-4 PE
倪老师,我查看BD公司IFN-γ的说明,上面用法写For optimal immunofluorescent staining with flow cytometric analysis, this anti-cytokine antibody should be
titrated (&_ 0.5μg mAb/million cells). 看不明白,每次需要多少啊
作者: niwanmao& & 时间:
倪老师,我查看BD公司IFN-γ的说明,上面用法写For optimal immunofluorescent staining with flow cytom ...
使用10E6细胞进行滴定,滴定的梯度均在0.5ug以内,你需要在这个范围内找到一个最佳的用量。
作者: 呓er& & 时间:
用CD4就不需要CD8了,但CD3也不用吗,细胞内使用IFNγ、IL-4,IL-17 吗。
Th1不就是CD4+IFN-γ+吗 我个人觉得双标就够了 做好同型对照很重要 对的 胞内的就是偶联荧光的那些抗体 不过IL-17是IL-17A
作者: olesama001& & 时间:
使用10E6细胞进行滴定,滴定的梯度均在0.5ug以内,你需要在这个范围内找到一个最佳的用量。 ...
一般是预实验摸最佳用量吗,一般设几个多大用量的梯度啊,还有预实验时是每种抗体单独试验吗,需要同型对照吗,同型对照的用量也需要摸最佳用量的话是不是还需要排列组合一下
作者: olesama001& & 时间:
Th1不就是CD4+IFN-γ+吗 我个人觉得双标就够了 做好同型对照很重要 对的 胞内的就是偶联荧光的那些抗体&&...
嗜酸粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和郎罕氏细胞均可表达CD4,不会干扰吗
作者: niwanmao& & 时间:
一般是预实验摸最佳用量吗,一般设几个多大用量的梯度啊,还有预实验时是每种抗体单独试验吗,需要同型对 ...
需要用确定阳性表达该标记的细胞进行滴定,一般从最大量开始,对半稀释滴定,找到最佳浓度。
如果你的抗体没法找到阳性细胞,那么建议找相关的文献,看他们的条件进行参照。
作者: olesama001& & 时间:
需要用确定阳性表达该标记的细胞进行滴定,一般从最大量开始,对半稀释滴定,找到最佳浓度。
如果你的抗 ...
有阳性对照,站里有相关的滴定操作方法资料吗
作者: 呓er& & 时间:
嗜酸粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和郎罕氏细胞均可表达CD4,不会干扰吗
最初圈细胞群时只圈淋巴细胞群 细胞因子那些细胞也能够分泌吗 我不了解了 再查查看吧
作者: niwanmao& & 时间:
有阳性对照,站里有相关的滴定操作方法资料吗
站内有抗体滴定的资料,请自行搜索。
作者: v2002lichao& & 时间:
Treg双标肯定不能做的啊
我怎么看了不少双标的文献呢?现在还不认吗?
作者: niwanmao& & 时间:
我怎么看了不少双标的文献呢?现在还不认吗?
能否给出几个链接?谢谢。
作者: v2002lichao& & 时间:
能否给出几个链接?谢谢。
作者: niwanmao& & 时间:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Neutralization+of+interleukin-17A+delays+progression+of+s ...
这篇文章标题和摘要都是Th17嘛。全文有没有?
作者: v2002lichao& & 时间:
这篇文章标题和摘要都是Th17嘛。全文有没有?
有 但是我怎么发给你呢?
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再生障碍性贫血的发病机制检查包括A.髓细胞染色体核型异常B.CD8+T抑制细胞比例增高C.Th1:Th2型细
悬赏:0&答案豆
提问人:匿名网友
发布时间:
再生障碍性贫血的发病机制检查包括A.髓细胞染色体核型异常B.CD8+T抑制细胞比例增高C.Th1:Th2型细胞比值增高D.CD4+细胞:CD8+细胞比值减低E.骨髓细胞染色体核型正常此题为多项选择题。请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!
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