“双抗原”CAR-T系统，精准识别肿瘤！--百度百家
“双抗原”CAR-T系统，精准识别肿瘤！
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提高治疗用T细胞ON-target活性的一种有效方法是改造它们使其需要识别组合抗原。2月11日，发表在《细胞》杂志上的一项研究中，科学家们工程改造了一种需要组合激活的T细胞回路（circuit）。
借助嵌合抗原受体（CARs）或T细胞受体（TCRs），T细胞能够定向杀死癌细胞。然而，因肿瘤特异性单一抗原较为罕见，这一疗法的发展受到了一定的制约。此外，目标抗原在其它组织中也存在时还会引发危及生命的不良反应。
提高治疗用T细胞ON-target活性的一种有效方法是改造它们使其需要识别组合抗原。2月11日，发表在《细胞》杂志上的一项研究中，科学家们工程改造了一种需要组合激活的T细胞回路（circuit）。
在这一回路中，对应其中一个抗原的一种合成Notch受体能够诱导对应第二个抗原的CAR表达。这种双受体AND-gate
T细胞（dual-receptor AND-gate T
cells）只有在肿瘤细胞同时表达两种抗原的情况下才会被激活。体内实验中，这些T细胞展现出了精准的识别与治疗，能够区分出只拥有单个抗原的非目标肿
瘤，且有效清除携带组合抗原的肿瘤。
2月19日，基于《细胞》上的这项研究成果，Nature Reviews Cancer杂志发布的一篇题为“Two antigens are
better than one”的文章指出，提高工程T细胞特异性的一个解决途径是设计一种独立于CAR 和TCR通路之外的新受体。
2月11日，发布在《细胞》杂志上的一项研究中，Leonardo Morsut和Kole T.
Roybal等人首次设计了一种基于Notch的组装式受体（即SynNotch受体）。随后Roybal等人利用这一平台设计了一个特别的系统。在这一
系统中，肿瘤上的一个抗原能够激活T细胞中的SynNotch，从而激活识别肿瘤上第二种抗原的CAR的转录，最终激活T细胞。
研究人员利用Jurkat T细胞设计了一个概念验证试验，经改造的T细胞具有可识别CD19抗原且包含四环素-
反式激活因子（tTa）域的SynNotch受体。tTa域会激活四环素效应元件驱动的CAR（对应抗原为mesothelin）的转录。体外培养中，这
些Jurkat细胞只会被同时表达了CD19和mesothelin的肿瘤细胞激活。
随后，研究人员在primary human CD4+ or CD8+ T细胞中设计了相似的系统。在这些细胞中，他们发现包括Gal4 VP64转录激活域的SynNotch受体具有较低的基本转录活性，这一特性在第一抗原不存在时可帮助防止CAR的表达。
这些表达SynNotch–Gal4
VP64的T细胞在癌细胞上对应的“约束条件”是绿色荧光蛋白（GFP）和CD19。体外试验中，只有同时表达GFP
和CD19的K562白血病细胞可激活这些primary T细胞。这两个不同的SynNotch–CAR系统展示出了相似的实验结果。
最终，经工程改造后拥有GFP SynNotch和CD19 CAR的primary
人类T细胞在体内试验中也获得了喜人的结果。免疫功能不全的小鼠被注射了CD19+ Daudi B cell
lymphoblastoid细胞，这些细胞均为GFP+。肿瘤形成后，向小鼠注入工程T细胞。结果显示，只有在GFP+肿瘤中，T细胞才表达CD19
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原代T细胞转染的基因操作利器--FM-Ad5型腺病毒
发布时间： 15:45&|&
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原代细胞的基因操作利器型腺病毒
T细胞及其特性简介
T细胞(T cell、T淋巴細胞/T lymphocyte)是的一种，在中扮演着重要的角色。T细胞在胸腺内分化成熟，成熟后移居于周围中。随着细胞免疫治疗的日益深入，T细胞的基因工程化改造显得越来越重要。 然后，细胞的基因操作却异常困难，普通的质粒根本就转不进去，即使是病毒介导的基因转染操作，也有不少难题，主要体现在几个方面 1.常规的慢病毒、逆转录病毒，由于1）T细胞膜上受体的不稳定；2）非激活的T细胞本身无增殖能力；3）T细胞内部有阻碍反转录的机制等原因而导致慢病毒和逆转录病毒的T细胞感染能力偏弱，需要多次重复感染，且对于实验操作的条件要求十分苛刻。 2.体外培养的细胞本身十分敏感且脆弱，慢病毒感染对细胞的状态影响非常大。 3.T细胞是悬浮细胞，进一步增大了病毒有效的难度。
汉恒Ad5型腺病毒服务 Ad5型腺病毒是现今应用最为广泛的基因工具，型腺病毒对于大部分细胞都有比较好的感染效果，而这种感染是特异性受体，即受体（）介导的。型腺病毒以病毒颗粒表面的区与细胞上的受体结合以启动感染。
图：CAR介导的腺病毒细胞侵染过程 Ad5型腺病毒不插入细胞基因组，毒性低，操作较安全。然而细胞上缺乏受体，型腺病毒的区无法识别细胞表面，因此普通的型腺病毒对于细胞基本上没有侵染能力。 对此，汉恒生物病毒载体工程师们通过多次实验，对型腺病毒的区实现了多次的嵌合改造，最终得到了可以高效感染细胞的型腺病毒，我们称之为（）
汉恒实例展示 从上图我们的实验结果来看，与对于一般细胞如等都具有很高的感染效果。而特别的，对于细胞系（一种人淋巴白血病细胞系），普通感染效果很差，而的感染效率非常高。 汉恒生物在这个基础上，进一步与客户合作，对汉恒生物的原代细胞感染能力进行了进一步验证。
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