各位大神有提取足月胎盘滋养细胞原代滋养细胞的吗是足月胎盘滋养细胞哦 试了好几次,感觉都掌握不了消化酶时间和用量网上说有用胰酶的,也说有用胶原酶的感觉不知道怎么选择。 最近一次取了10ml胎盘滋养细胞组织(差不多一个胎盘滋养细胞小叶那么多)漂洗剪碎后,用20%IV型胶原酶配成40ml消化体系(包括0.05g/ml的胶原酶8ml和2000IU/ml的DNase 过夜后看到少量贴壁滋养细胞真的很少量,中倍镜下20个/视野换液。 过两天再换了液感觉略微有增殖,但因为最開始细胞实在太少了所以还是很稀疏。 后来有事情就搁在培箱里没管任由其自生自灭放了五天,再去看居然快长满了…就又换了液放著 再过了五天研究所老师想问我要这批细胞的培养上清液,就给了顺便再换液还说了句细胞长得很好 惊呆了五天这样不管它们,居然長势还行 养到现在两周了明天去看看怎么样 感觉每次这样要养它两周才能长起来,还是太艰难了真的是当爸爸供着。 所以最开始细胞數量还是太少了是组织取的不够还是消化手段不对呢 |