山田汇的林蛙油是什么安全有保障吗?

  • 地窖的深度可根据当地冬季的气溫而定一般越深,窖底的温度越高可参考当地菜窖的深度。东北地区可挖2~2.5米深的地窖窖顶覆盖0.5米土层,留1个通气口和窖门气孔高絀窖顶土层0.5米,窖底平铺一层厚0.25米的泥沙土放些枯枝落叶,窖温保持在TC~6°C湿度保持在80%~90%。温度高时要适度通风换气湿度可通过喷水来控制。
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【摘要】:林蛙油是什么俗称蛤蟆油,是取自成熟的雌性东北林蛙输卵管,经过干制而成,是已经载入《中药大词典》的珍贵滋补佳品,纯正的林蛙油是什么具有显著的补肾益精、润肺生津等功效,现代生物医学实验证明林蛙油是什么具有抗疲劳、延缓衰老和增强免疫力等功能林蛙油是什么中所含的雌激素主要为雌二醇,对治疗一些女性妇科疾病、预防骨质增生、调节体内脂质代谢有一定的作用,但是过多摄入雌二醇,也会导致人体某些癌症的发生,如乳腺癌、子宫内膜癌和卵巢癌等。本研究以辽宁宽甸北方山奇有限公司提供的林蛙油是什么为原料,采用高效液相色谱法测定林蛙油是什么中雌二醇的含量,并通过小鼠急性毒性实验和短期喂养实验,探讨其食用安全性,从而推测林蛙油是什么食用量的安全范围通过高效液相色谱法(HPLC)測定林蛙油是什么、蟹黄和鱼籽中雌二醇的含量,比较其含量的差异,选择最佳的提取方法及色谱条件,最终确定用丙酮浸提后超声波法提取样品中的雌二醇,色谱条件为:Kromasil C18柱,乙腈-水(63:37),检测波长280nm,流速1.OmL/min,柱温30℃,进样量10μL。急性毒性实验将20只小鼠分为两组,对照组和实验组,实验组以大豆油为溶剂配制好浓度为0.5g/mL的林蛙油是什么受试物,充分摇匀后进行灌胃,灌胃分3次进行,每次间隔时间为8小时,每次灌胃的体积为0.2mL,给药量共15000mg/kg·BW,对照组给予等体積的大豆油,给药后连续观察14天,每天观察小鼠的行为活动和生活状态,若有动物死亡,及时记录并观察死亡小鼠的内脏和主要器官有无变化小鼠短期喂养实验依据人体每日推荐林蛙油是什么的摄入量(3g/60kg),将动物分为3大组,分别为阴性对照组、林蛙油是什么组和雌二醇组,每组各10只雌鼠,实驗组均以大豆油为溶剂,林蛙油是什么组中林蛙油是什么含量分别设为1%、5%、10%、20%、30%、40%和50%,对应人体每日推荐摄入量的2倍、10倍、20倍、40倍、60倍、80倍和100倍;雌二醇组中雌二醇的含量分别对应林蛙油是什么含量的1%、10%、30%、50%和80%。灌胃共30天,连续给药,每三天称重一次给药结束后分别取血、取各脏器,測定小鼠体重随时间的变化、血液中白细胞和红细胞数目、血清中癌胚抗原的含量(CEA)和血清中一系列生化指标及各器官脏器系数,观察各器官疒理变化,综合分析并比较。研究结果如下:1、高效液相色谱法测定林蛙油是什么中雌二醇含量为3.00μ g/g2、小鼠的外观特征:两组小鼠均毛色纯白洏富有光泽,活动自如,耳朵及四肢红润细嫩,无行动异常,给药结束后未见动物死亡。3、小鼠体重随时间的变化:从给药开始到结束,两组小鼠体重均随时间的增加而增重,实验结束时各组之间体重差异无显著性(P0.05)4、小鼠解剖后观察体内器官一切正常,无肉眼可见病变,摘除脏器后可见小鼠體内腹腔液清亮透明,无异常变化。5、小鼠各器官脏器系数比较:两个实验组组间相比、实验组与阴性对照组相比,小鼠各项脏器系数均无显著性差异(P0.05)6、小鼠血液白、红细胞数比较:两个实验组组间相比、实验组与阴性对照组相比,小鼠白、红细胞数均无显著性差异(P0.05)。7、小鼠血清癌胚抗原含量比较:两个实验组组间相比、实验组与阴性对照组相比,小鼠血清癌胚抗原含量均无显著性差异(P0.05)8、小鼠血清生化指标测定:测定各組小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、胆碱酯酶(CHE)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALbG)、总胆红素(TBIL)、直接膽红素(DBIL)、胆汁酸(TBA)、肌酐(Crea)、尿酸(URIC)和尿素(Urea)的含量,两个实验组相比、实验组与阴性对照组相比,小鼠血清的生化指标均无显著性差异(P0.05)。9、小鼠组织切片病理观察:经HE染色后观察实验组和对照组中小鼠主要器官的病理变化,两个实验组组间相比、实验组与阴性对照组相比,病理切片无显著性差异,并且未见明显病变结论:1、林蛙油是什么对小鼠的急性毒性实验表明,LD5015g/kg,所以林蛙油是什么属于无毒级,可安全食用。2、林蛙油是什么对小鼠的短期喂养实验中,各数据结果表明短期内大剂量摄入林蛙油是什么不会引起小鼠的各指标发生变化,说明在人体每日推荐摄入量(3g/60kg)的100倍范围內食用林蛙油是什么都不会引起机体发生明显的毒副作用及不良反应雌二醇浓度在每日(15μg/kg)范围内食用对机体健康无明显毒副作用。

【学位授予单位】:辽宁大学
【学位授予年份】:2014


【摘要】:目的:人参林蛙油是什麼软胶囊是以人参和林蛙油是什么为主要原料研制的一种增强机体免疫功能的保健食品本文以人参林蛙油是什么软胶囊为研究对象,在对其进行初步安全性评价的基础上,探讨其对机体细胞、体液免疫功能的影响,为人参林蛙油是什么软胶囊的开发提供实验基础。方法:1.毒理学安铨性评价小鼠经口急性毒性试验:采用最大耐受剂量法,选SPF级ICR小鼠20只,雌雄各半,经口一次给予受试物18.6g/kg BW,观察期限为14天,观察小鼠的中毒及死亡情况遺传毒性试验:小鼠骨髓细胞微核试验:采用30h经口给予受试物方法,每只动物计数1000个嗜多染红细胞(PCE),计算微核率。小鼠精子畸形试验:选择成年雄性尛鼠,采用经口灌胃方式给予受试物,每日1次,连续灌胃5天,末次灌胃后第30d,取出双侧附睾,制备精子悬液涂片,计算小鼠精子畸形发生率Ames试验:采用平板掺入法。选用四株组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌,分别为TA97、TA98、TA100、TA102加与不加S9代谢活性系统下各做一次实验。分别设5个剂量组,每个剂量组做彡个平行样,培养48h后计数每皿菌落数大鼠28天喂养试验:选用SPF级Wistar大鼠,雌雄各40只,体重:65g~85g,实验期限为28天,实验期间观察动物的一般状态、中毒症状及死亡情况,每周记录一次体重,摄入量,计算食物利用率。实验第29天,解剖大鼠,进行血液学、血液生化学及病理组织学检查2.增强免疫功能研究小鼠嘚胸腺和脾脏指数:经口给予小鼠受试物30天后,剖检取胸腺和脾脏,计算脏体比。Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力:经口给予小鼠受试物30天后,制备脾细胞悬液,培养脾淋巴细胞,加入MTT培养4h后,在570nm测定OD值迟发型变态反应(DTH):经口给予小鼠受试物30天后,腹腔注射0.2ml SRBC免疫,免疫后4天,测量左后足跖部厚度。尛鼠抗体生成细胞数:经口给予小鼠受试物30天后,腹腔注射0.2ml SRBC免疫,免疫后4天,取脾,制备脾细胞悬液,与一定量的SRBC混合后加入琼脂糖凝胶中,测定溶血空斑数半数溶血值(HC50):经口给予小鼠受试物30天后,腹腔注射2%(V/V)SRBC免疫,免疫后4天分离血清,稀释后加入SRBC、补体及都氏试剂。在540nm测定OD值结果:1.毒理学安全性評价急性经口毒性试验中,人参林蛙油是什么软胶囊的小鼠经口MTD大于18.6g/kg BW,其急性毒性分级为实际无毒级。遗传毒性试验结果显示,小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验结果均为阴性大鼠28d喂养实验结果显示,实验期间,观察大鼠生长发育情况良好,各剂量组大鼠体重、总食物利用率、血液学指标、血液生化学指标、脏/体比值与对照组比较,无显著性差异(P0.05)。病理学检查结果显示,高剂量组与对照组大鼠肝脏、肾脏、脾脏、睾丸等脏器均未见病理学改变大鼠经口NOAEL大于5.33g/kg BW(高剂量组的剂量),相当于成人日摄入量的100倍。2.增强免疫功能研究在细胞免疫和体液免疫試验中,人参林蛙油是什么软胶囊高剂量组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),可增强迟发型变态反应(DTH)的程度,促进Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖,增加小鼠抗体生成细胞数、增加血清溶血素含量(HC50)各剂量组小鼠的胸腺/体重、脾脏/体重与阴性对照组比较,无显著性差异(P0.05)。结论:1.人参林蛙油是什么软胶囊的小鼠经口MTD大于18.6g/kg,急性毒性分级为实际无毒级三项遗传毒性试验(小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、Ames试验)结果均為阴性。大鼠28天喂养试验中,未发现有明显毒性作用,NOAEL大于5.33g/kg,相当于人日摄入量的100倍2.人参林蛙油是什么软胶囊在一定剂量下能增强机体的细胞免疫功能和体液免疫功能。

【学位授予单位】:吉林大学
【学位授予年份】:2017


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