广东眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2的分离纯化及抗血小板聚集作用--《蛇志》2000年01期
广东眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A_2的分离纯化及抗血小板聚集作用
【摘要】：目的　研究眼镜王蛇毒中酸性磷脂酶 A2 对血小板的作用。方法　采用 CM-Sephadex C-2 5,Sephadex G-75,DEAE-Sephadex A-2 5,Sephadex G-75多步柱层析法 ;聚丙烯酰胺凝胶电泳 ;酸性磷脂酶 A2 酶活性测定 ;血小板聚集实验。结果　从粗毒中分离纯化出一酸性磷脂酶 A2 单体 ,分子量为 1 4KD;等电点 p I3 .8;PLA2 比活力 2 0 μmol· mg- 1 ·min- 1 ;小鼠腹腔注射 LD5 0 为 ( 7.53± 1 .2 9) mg.kg- 1 ;对 ADP、花生四稀酸、凝血酶诱导的兔血小板聚集均有抑制作用 ,具有剂量依赖关系。结论　广东眼镜王蛇毒酸性磷脂酶单体具有抗血小板聚集的作用。
【作者单位】：
【分类号】：R996.3【正文快照】：
磷脂酶 A2 ( PLA2 )在蛇毒中含量丰富 ,并呈显广泛的药理作用 ,如溶血、抗凝、降压等。眼镜王蛇毒属混合毒 ,含溶血及血液毒素 ,有报道其PLA2 主要集中在组份 I[1] ,但进一步的分离纯化未见报道。本文对广东产眼镜王蛇毒分离峰 I进一步分离纯化及单一组份的部分性质作一报道。
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白化眼镜王蛇
白化眼镜王蛇，英文名Ophiophagus hannah，又称山万蛇、过山风、大扁颈蛇、大眼镜蛇、大扁头风、扁颈蛇、大膨颈、吹风蛇、过山标等。此类蛇分布于及等地，主要栖息于中。其平均体长为3.6–4米，体重一般为6千克。在年左右。相比其他性情更凶猛，反应也极其敏捷，头颈转动灵活，排毒量大，是世界上最危险的蛇类之一。在我国与常有出没，通常栖息在草地、空旷坡地及树林里。它的主要食物就是与之相近的同类──其他蛇类，所以在白化眼镜王蛇的领地，很难见到其他种类的蛇，它们要么逃之夭夭，要么成为白化眼镜王蛇的中之物。极强。
白化眼镜王蛇外形特征
白化眼镜王蛇（学名：Ophiophagus hannah）是世上体型最长的毒蛇，体长可达5.6米（18英尺）， 分布在印度及、等东南亚一带，主要栖息于中，以别的蛇类为食。虽称为“白化眼镜王蛇”，但此物种与真正的眼镜蛇不同，它并不是眼镜蛇属的一员，而是属于独立的眼镜王蛇属。由于各种因素，白化眼镜王蛇被公认是一种相当危险的毒蛇。它也在很多地区文化中有着重要的地位。
白化眼镜王蛇属剧毒蛇类，体长120~550厘米，体重2~8千克。
白化眼镜王蛇体色白色或黄色，具有40~54条较窄而色淡的横带。
白化眼镜王蛇栖息环境
白化眼镜王蛇多于沿海低地到海拔1,800米的山区，多见于森林边缘近水处，林区村落附近也时有发现。
白化眼镜王蛇生活习性
白化眼镜王蛇掠食行为
白化眼镜王蛇是毒蛇类中寿命最长的，一般可达25年。它直立起来通常可高达1.80米，几乎可以与一个成年人对视。古代的及马其顿战士曾有类似的描述，似乎只有白化眼镜王蛇才能办得到。
白化眼镜王蛇像其他眼镜蛇一样，在受到危险时会抬起身体的前三分之一，然后它会张开嘴，露出毒牙，一面盯着你，一面留意着四周的环境；它还会发出巨大的嘶嘶声，如果敌人还不走，白化眼镜王蛇就会采取行动，通常悲剧就是从这里开始的。
以白化眼镜王蛇这般大的个头，除人类，不会有动物敢随便挑逗眼镜王蛇的。（就连印度境内的大象，见到白化眼镜王蛇都会绕路走，尽量避开白化眼镜王蛇）
而与其他的蛇类一样，白化眼镜王蛇也是用分叉的舌头作为嗅觉器官。当猎物的气味被探索到时，白化眼镜王蛇会使用它的绝佳的视觉器官（能在100米外发现移动的物体）及杰出的“智慧”发起攻击。将猎物毒死后，白化眼镜王蛇会将其整个吞下，慢慢消化掉。
白化眼镜王蛇的食物通常是其他蛇类，白化眼镜王蛇的体内有抗毒的血清，所以当其他毒蛇对白化眼镜王蛇施咬时，白化眼镜王蛇通常会安然无恙。包括体积适合的蟒蛇，其他种类的毒蛇与无毒蛇，像眼镜蛇、金环蛇、银环蛇、鼠蛇等，而当食物不充足时，它们甚至连其他同类也会吃，因此，白化眼镜王蛇又被称之为&蛇类煞星&。
某个程度上，白化眼镜王蛇也会捕食其他脊椎动物，如蜥蜴等。饱餐一顿后，白化眼镜王蛇可以几个月不再进食。虽然它的夜视能力不强，白化眼镜王蛇仍可以全天捕食猎物，导致人们都认为它是昼出捕食动物。
白化眼镜王蛇生活习性
一般隐匿在岩缝或树洞里，有时也能爬上树，往往是后半身缠绕在树枝上，前半身悬空下垂或昂起。昼夜均活动。白化眼镜王蛇喜欢独居。白天出来捕食，夜间隐匿在岩缝或树洞内歇息。它不仅非常凶猛，靠扑咬猎物获取，而且也是上最大的一种前沟牙类毒蛇。白化眼镜王蛇之所以名闻遐尔，是因为它主食蛇类,包括、、等有毒蛇种，也捕食、、小型鸟类。
生活在平原至高山树木中，常在山区溪流附近出现，林区村落附近也时有发现。一般隐匿在岩缝或树洞里，有时也能爬上树，往往是后半身缠绕在树枝上，前半身悬空下垂或昂起。昼夜均活动。
白化眼镜王蛇生活于密林中，有时亦上树或在溪流附近，白天活动，喜在阴凉处栖息，捕食蜥蜴、蛙、鼠、蛇等，性极凶暴，激怒时前半身竖起，颈部膨胀，“呼呼”作声，袭击人和其他动物。
栖息于沿海低地到海拔1 800 m的山区，多见于森林边缘近水处。白昼活动。主要捕食蛇，偶尔吃蜥蜴等。卵生，7～8月产
卵20～40枚于枯叶筑成的窝内，眼镜王蛇是惟一会搭窝的蛇类，卵径65.5 mm×33.2 mm。
亲蛇有护卵习性。 眼镜王蛇性情凶猛，会主动攻击人，咬住人后紧紧不放。其毒液不仅毒性强烈，而且排毒量大，一次可排出毒液400mg（干重100mg），相当于致死剂量的几倍。
但有时，白化眼镜王蛇也会生活在沙漠，被称为“沙漠之金”
白化眼镜王蛇行为特征
蛇是近视眼，里没有鼓膜，对空气里传来的声音没有什么反应。它识别天敌和寻找食物主要靠舌头。如果你遇到白化眼镜王蛇，假如它不向你主动进攻，千万不要惊扰它，尤其不要使地面受到振动，最好等它逃遁，或者等人来救援。
白化眼镜王蛇是一种很高的蛇类，它们捕猎其他的蛇，而且能分辨对方是否有毒。在捕食无毒蛇时，白化眼镜王蛇并不轻易使用毒液，它会随便咬上一口不放，任凭猎物挣扎反抗，直到死后再慢慢吞食。在捕食毒蛇时，它则不会轻举妄动，而是不断，当对方终被激怒向它发起进攻时，白化眼镜王蛇会机警地躲闪，最后猎物身心疲惫、无心恋战时，它看准机会，一口咬住猎物头颈并释放毒液将其杀死。还好白化眼镜王蛇在野外并不是很常见，一旦与人遭遇，它常会像眼镜蛇一样，招牌式地立起上半身，将脖颈张开，露出喉部鲜明的黄白色鳞片，并不时发出咝咝声，叫人望而生畏。白化眼镜王蛇行动敏捷，头部可灵活转动，不但可向前后左右方向攻击，还可以垂直窜起来攻击头顶上方的物体。咬住东西后常不会轻易撒口，毒液中干毒约100，而平均致死量为12毫克，被咬者会在数分钟内引发肿胀、反胃、腹痛、呼吸麻痹，出现言语障碍，昏迷等症状，人在被咬后的半小时内如没有及时的药物治疗必定死亡。
白化眼镜王蛇分布范围
分布在及、等一带，生活于平原至海拔 1000 米的。在中国、、、、、、、和，主要栖息于中，以别的蛇类为食。虽称为“白化眼镜王蛇”，但此物种与真正的不同，它并不是眼镜蛇属的一员，而是属于独立的眼镜王蛇属。目前国内已有养殖。
白化眼镜王蛇只分布在。
分布在我国、、、、、、、、、和。
国外分布于东南亚、及印度。
生活于平原至海拔 1000 米的山区。
白化眼镜王蛇种群现状
据统计1991和 1992年仅边境，眼镜王蛇的流通量分别达到36和18吨。目前，其种群数量已急剧下降，野外犹难得一见，处于状况。现在国内的部分动物园及养蛇场虽有饲养，但其饲养的白化眼镜王蛇皆为野外捕捉；且由于多种原因，至今尚没有在饲养下正常产卵孵化的报道；所饲养的蛇，往往在一、二年内死去，因此，通过繁殖以增加种群数量的目的一时尚难以达到。在这种情况下，保护白化眼镜王蛇的自然生态环境，遏止或杜绝对野生白化眼镜王蛇的捕杀，是白化眼镜王蛇唯一生存下去的希望。然而白化眼镜王蛇却仍未被列入国家重点保护野生动物名录，即不受国家法律的保护，长此以往，白化眼镜王蛇在我国将有绝灭之虞。
白化眼镜王蛇保护级别
世界最大的前沟牙类毒蛇，一直被人类视为世界上最危险的蛇，却难敌自然之界最大、而又最贪婪的敌人──人类。长期以来眼镜王蛇被人类捕捉杀戮，被人类作为餐桌上的美味、工艺品（蛇皮）以及药物（和毒液）。凡在野外被人类发现者，均遭捕杀，鲜有幸免。据统计年仅广西边境，白化眼镜王蛇的流通量分别达到36和18吨。目前，其种群数量已急剧下降，野外犹难得一见，处于濒危状况。现在中国的部分动物园及养蛇场虽有饲养，但其饲养的白化眼镜王蛇皆为野外捕捉；且由于多种原因，至今尚没有在饲养下正常产卵孵化的报道；所饲养的蛇，往往在一、二年内死去，因此，通过繁殖以增加种群数量的目的一时尚难以达到。在这种情况下，保护白化眼镜王蛇的，遏止或杜绝对野生白化眼镜王蛇的捕杀，是白化眼镜王蛇唯一生存下去的希望。
因为白化眼镜王蛇肉质鲜美，可制成工艺品，蛇毒、蛇胆又有极高的药用价值，所以在野外被发现的白化眼镜王蛇无一幸免，全部遭到捕杀，如不及时采取保护，有灭绝可能。
已被列入《濒危野生动植物种国际贸易公约》附录II名录中。中国的、贵州省已将它列入省级野生动物名录。
保护等级：CITES附录Ⅱ，“三有”名录。
白化眼镜王蛇毒性介绍
白化眼镜王蛇毒性特征
白化眼镜王蛇的毒液里主要含有，另也包含了心脏毒素。[2]毒素由及所组成。
在攻击时，蛇毒会经毒蛇那长1.25厘米的毒牙注入受害者体内，毒素会迅速袭击被咬者的，导致剧痛，视力障碍、晕眩、嗜睡及麻痹等症状；伤者会因心脏血管系统崩溃而进入休克状态；最后会因呼吸衰竭、心跳减弱而死亡。临床个案显示，被咬者也有机会出现的情况。[3]
和别的毒蛇一样，白化眼镜王蛇毒液的毒性测试结果在不同的研究中都有不同，因为数据会随着不同的注射及研究方法而产生变化。实验白鼠皮下注射的1.7 mg/kg，的1.31 mg/kg及腹腔注射的1.644 mg/kg为较常被引用的数据。[4]另一个研究则在五只东南亚野生白化眼镜王蛇身上得出1.93 mg/kg（皮下注射）的结果，[5]也有研究显示，白化眼镜王蛇的毒性为0.34 mg/kg（肌肉注射）。[6]不同地区的个体的毒性也可能略有不同。
白化眼镜王蛇的一咬可以迅速致命。它平均能注入200—500的毒液，最大的毒液分泌量甚至能达7。[6-9]被咬者往往需要大量的抗毒来对抗蛇毒，阻止毒素进一步破坏身体机能。[10]更有指白化眼镜王蛇一口所能注入的毒液能于3内杀死一头成年的。[9]被咬伤后的死亡率以及死亡的速度受很多因素影响，如毒蛇所注入的毒液量、被咬位置、伤者的健康状况等。另外，由不同地区组织所作出的调查也可能会给予不同的答案。例如，虽有一网页报告提到，白化眼镜王蛇通常都只注入不足以致命的毒液分量，[11]但另一个由南印度医院所发表的蛇咬个案报告则显示，有三分之二被白化眼镜王蛇咬伤的病人都被注入了大量毒液，属于“危殆”级别。[3]根据临床毒理学部门的说法，被白化眼镜王蛇咬伤后的致死率大约为60%。[12白化]眼镜王蛇蛇咬能迅速致人於死地，伤者可在30内死亡。[10]
现在有两种抗蛇毒用於对抗白化眼镜王蛇的毒素，国际红十学会组织於生产其一；中央研究所於印度生产其二，但二者的产量都不算高。[13]
近期，有科学家发现白化眼镜王蛇的具有一定的医药价值。
白化眼镜王蛇蛇毒取制
操作时须两人搭档；1个人用手抓住眼镜王蛇的头部，另1个人用竹筷或33cm左右长的棒塞入里，下面用小碗接着，蛇撕咬时，毒液便从牙管中射出来，用此法逐条取毒。然后将毒液放到离心机转3-5分钟，再进行干燥，即为蛇毒（晶体）。专家提示：
①蛇类列为上海市重点保护动物，建办养蛇场须征得当地林业部门同意并申办繁殖许可证。
②养蛇人员须装备防护衣鞋手套，现场应备救治蛇伤的器械。
白化眼镜王蛇8主要价值编辑
白化眼镜王蛇医药用途
药名：眼镜王蛇毒
拼音：YANJINGWANGSHEDU
来源：为眼镜蛇科动物眼镜王蛇的毒物。
功效：止痛、破血散结。
主治：用于各种疼痛症、经闭症瘕、。
性味归经：辛，温，有大毒。心经。
用法用量：内服：需经特殊加工后才能服用。考证：始载于《中国药用动物志》。
中药化学成分：为金黄色蛋清粘稠液，每条蛇咬物平均一次排出的毒液量为382.4毫克，低温真空干燥物重101.9毫克，毒液含固体量26.6%，水分73.4%。含磷脂酶A2（PhospholipaaseA2），L
一精氨酸酯水解酶（属于不含金属的型蛋白质，是一种耐热的氨基酸酯水解酶）、类、三磷酸腺苷酶、5一、抗凝血活酶等。含2个毒素，由13个氨基酸残基组成，分子内有5双硫键效联、氨基酸排列顺序与眼镜蛇属（Naja）.环蛇属（Bungarus）的神经毒有类似之处。尚含多肽DE一1（PolypeptideDE一1），由60个氨基酸残基组成，分子内由4双硫键交联，氨基酸排列顺序虽与短链神经毒相似，但毒性极低。
白化眼镜王蛇经济价值
眼镜王蛇是经济价值很高的特种经济动物，其皮、肉、血、胆、蛇毒
等各具不同的药用价值。特别是蛇毒是目前国际市场极为短缺的动物性，在国际市场上被誉为&液体&其价格比黄金贵几十倍，供不应求。蛇产品具有多种综合性用途，主要表现以下几点。
1．蛇蜕是蛇类蜕下的皮壳。中药称&龙衣&除冬眠期外均可收集入药。具有祛风、明目、解毒、杀虫等功效。常用于治疗各种顽固性疾病，如疥疮、肿毒和带状疱疹等。
2．蛇胆中医学认为，蛇胆具有行气化痰、搜风祛湿、清肝明目，平胆熄风的功用。可治疗急性和慢性支气管炎、百日咳等呼吸系统疾病；此外还能治疗痛、小儿惊风、老人中风等多种疾病。
3．蛇血中国南方有些地区群众素有饮鲜蛇血的习惯，除治疗关节和变形外，还有&升白&作用。
4．蛇内脏主要用于治疗，有些地区的群众也用薪蛇（尖吻蛇）睾丸治疗梅毒病。
5．蛇毒制剂可治疗癌肿、各种痛、小儿麻痹及其后遗症、椎体外神经麻痹和血友病等。
6．蛇油多用于治疗冻疮、烫伤、慢性等。
7．蛇干和蛇肉具有祛风解毒、镇静止痛的功能，能治疗风湿脾痛、四肢麻木，半身不遂等。此外两广、港澳地区人们有喜食鲜蛇肉的习惯；蛇皮还能制琴膜和鼓皮等。
白化眼镜王蛇9人工养殖编辑
白化眼镜王蛇人工繁殖
分布于中国云南、贵州、广西、广东、福建、浙江等省，也产于印度及东南亚一
带，野生资源极少，其蛇毒（晶体）以克计值，蛇肉价格较高，人工养殖效益高，市场前景广阔。 场地应选择避风向阳地带，采用室内笼养或露天建池养殖。
1．室内笼养，1只铁笼养一只，视蛇大小确定密度，一般采用丝或材料制作，蛇笼体积为30*20*60cm；笼内设置1个固定的水槽，蛇笼上方做2个盖，里层为活动盖，外层盖为固定盖，这样较安全。
2．露天建池养殖，一般建3个池，分小蛇池、中蛇池、大蛇池，每个池的面积为30-50平方米；池四周墙高为4米，墙壁要光滑，墙顶做成“r”字形；池内做蛇窝，池内建一个长2米、宽1米、深0.3米的小水池。
白化眼镜王蛇日常管理
1．养眼镜王蛇，要养些蛙类、黄鳝，也可按养鸡的方法喂配合饵料，喂猪、牛、鸡、鸭屠宰场的下脚料，可先将下脚料切成小块煮熟，定时、定量、定位存食。销售旺季时，在前1天先投下一些活的小鸡、小鸭、蛙类等，每天投喂1-2次，吃完为止。
2．随时注意观察蛇的吃食和排泄情况，并据此来增减饵料，发现病害时对症下，保证池中随时有水，每天应将笼或池中的粪便冲洗干净。
3．眼镜王蛇卵生，以堆成巢窝，产卵于窝内，每产20-30枚，多达40枚，雌蛇有护卵习性，繁殖配对1公配5母（公蛇长度较母蛇短）。
4．眼镜王蛇吃活体动物，应逐渐过渡到吃动物下脚料和配合饵料井为主食，并注意饵料适时的更换。
5．养殖过程中，设施要严密，防止伤人，进入露天养殖场地应穿戴全身防护服。
6．一般一条200g的小眼镜王蛇从入春到冬眠前体重可达500-650g，捕捉可事先投喂安眠药，或用0.7—1米长的铁钳；也可用低压的击一下，然后捕捉。每条蛇重在500g以上即可上市。
白化眼镜王蛇疾病防治
人工养殖眼镜王蛇易得和。肠炎病拉稀时，可在饵料中加几片和氯霉素片剂治疗。患寄生虫病时体形较瘦，可在饵料中加些左旋咪唑进行驱虫。若患体表寄生虫，则可用10%—15%的高锰酸钾溶液进行喷雾驱虫。
眼镜王蛇体内有多种寄生虫。寄生虫病轻的会削弱体质，引起其它疾病，严重的常直接导致死亡。
防治方法：
①是的幼虫，蛇类是孟氏的第二中间宿主。多在皮下寄生，一般对蛇类危害不大。
若寄生在蛇体表皮下，可用利刀剖开皮肤取出，然后在伤口涂1%~2%。寄生在其它部位，不用专门治疗，可在治其它寄生虫时附带治疗。
② 鞭节舌虫寄生于蛇的肺部和气管中，危害很大，能使蛇窒息致死。
对此种寄生虫可用兽用敌百虫溶液灌入胃中，按每千克体重0.01克给药，连续灌胃3天。
③ 棒线虫 寄生于肺泡腔内，多时密布患部，使蛇肺部糜烂而死。
治疗用四咪唑，每千克体重0.1~0.2毫克灌服。
④ 异双盘吸虫寄生于蛇的胆囊中。
⑤ 蜱虱 蜱虱是由笼舍及饲养环境卫生条件差而引起的感染性疾病。
蜱虱可使蛇体血清蛋白减少，并传播病原体，给宿主带来强烈的不良刺激，降低免疫力，常导致发生全身性疾病。
白化眼镜王蛇应对方式
白化眼镜王蛇出行注意
野外活动最好穿高帮鞋。在草木生长繁盛的地方，要用木棍之类撩动草木，以赶走毒蛇。被蛇咬伤后实行早期急救尤为重要。要遵循冷静、结扎、冲洗、排毒的原则进行。[16]
白化眼镜王蛇自救步骤
一：用打火机点燃火烧灼伤口，这样容易破坏蛇毒的毒性；
二：在伤口近心脏一端扎住血管，避免蛇毒扩散，但切记扎1—2小时后要松一次，否则易引起肢体坏死。此部必须要最快速度，万不可和第三步颠倒。
三：到水源地冲洗伤口，在伤口齿痕为中心，划开2CM~3CM长的十字形，用拔毒罐或者另外吸取工具引流走毒血。绝不能用嘴吸，不然会对口腔黏膜引起二次中毒感染。注：血液型蛇毒中毒后最好不要使用这种方式，会使血液难以凝固而流血不止。
四：及时去附近大医院就医。
白化眼镜王蛇注意：
目前国内蛇毒血清较齐全医疗机构不多，去蛇类频繁出没的地方。旅行前事先了解清楚附近医院相关药物储备是比较重要的。[17]