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硕士论文--α细辛脑巴布剂的研究
沈阳药科大学 硕士学位论文 α细辛脑巴布剂的研究 姓名：周晖 申请学位级别：硕士 专业：药剂学 指导教师：王东凯
沈阳药科大学硬士学位论文摘要Ｑ细辛脑（ａ―ｈｓａｒｏｎｅ），又名ｎ细辛脑，是天南星科植物石菖蒲的 主要有效成份之一。具有显著镇咳、祛痰、平喘和镇静抗惊厥作用。Ｉｌ缶床 用于治疗慢性支气管炎，慢性阻塞性肺病和癫痫，是初发癫痫患者首选药 之一。目前市售的主要剂型为注射剂，片剂，胶囊等。由于口服和注射给 药时，ｎ细辛脑易引起胃肠道不良反应，生物利用度低“１，且长期给药， 易造成严重的毒酬作用。１：同时ｎ细辛脑具有脂溶性好、熔点低、分子量 小等特点，考虑将其制成经皮给药制剂。又由于巴布剂容量高，载药量大， 基质具有良好的保湿性，易使角质层软化，有利于药物透皮吸收，且无过 敏反应。因此本文研制并考察了ｎ细辛脑巴布剂。 本文首先考察了ａ细辛脑的基本理化性质，测得ａ细辛脑的ｌｏｇＰ（正 辛醇／水）等于２．１９５，属于脂溶性的小分子药物，适于经皮给药。ａ细辛 脑在２０％乙醇生理盐水中的溶解度为０．４７ｍｇ／ｍ１。为了提高ａ细辛脑的经 皮渗透量，我们采用水平扩散池，以２０％乙醇生理盐水为接受液，对几种 促渗剂进行了筛选，结果表明ａ细辛脑的经皮渗透为零级过程，渗透速率 （ＪＤ和渗透系数（Ｐ；）均较小，分别为０．０６０３｜ｌ ｇｃｍ－。ｓ１和１．３７ｃｍｓ一，滞 后时间为３．８６ｈ。采用促渗剂（氮酮：油酸＝３：７）时，能够使药物的Ｊｓ 增加到０．２７２８ ｕ ｇｃｍ－Ｚｓ～，使Ｐ；提高到５．８４ｃｍｓ一，增渗倍数ＥＲ为４．２８倍， 滞后时问缩短至０．５７ｈ。 本文在考察空白基质的基础上，采用热熔法制备巴布剂；并采用正交 设计法，以体外释放度为考察指标，对巴布剂的配方进行优化选择；并参 照２０００版药典，对ａ细辛脑巴布剂进行了质量评价，各项指标均符合规 定。加速实验及室温留样实验均表明ａ细辛脑巴布剂稳定，刺激性实验表 明ａ细辛脑巴布剂对皮肤安全、刺激性小。沈阳药科大学硕士学位论文摘要本文考察了ｄ细辛脑巴布剂经离体鼠皮肤和离体人皮肤的渗透性。渗 透速率（Ｊｓ）分别为０．０１５４ｌＪ ｇｃｍ－２ｓ“和０．０９９２ｕ ｇｃｍ－２ｓ～。表明Ⅱ细辛脑 巴布剂经离体皮肤的渗透为零级过程。 本文考察了家兔局部应用ｎ细辛脑巴布剂和口服ｎ细辛脑胶囊后的 药动学参数。ＡＵＣ分别为７．１５３８和２．３０００，二者相对生物利用度为 ３１１．０３％，表明ｎ细辛脑巴布剂可明显提高ｎ细辛脑的生物利用度。关键词：ｎ细辛脑；巴布剂：经皮吸收：促渗剂；体外释放度；正交设计 法；药动学２兰里塑型查竺堡兰兰竺兰兰―――――――――――――！！生ＳＴＵＤＹ ＯＮ Ａ－ＡＳＡＲＯＮＥＺｈｏｕＣＡＴＡＰＬＡＳＭＡｈｕｌ（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ）Ｗａｎｇ ｄｏｎｇｌ沮ｉｄ－Ａｓａｒｏｎｅ ｉｓｏｎｅｏｆ ｔｈｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｏｆａｃｏｒｕｓ鼢ｒｎｉｎｅｏｕｓａｎｄｓｏｌａｎｄ．Ｉｔｈａｓａｎｔｉｔｕｓｓｉｖｅ，ａｐｏｐｈｌｅｇｍａｔｉｃ，ａｎｔｉａｓｔｈｍａｔｉｃ，ｓｅｄａｔｉｖｅｅｐｉｌｅｐｓｙ．Ｉｔｉｓａｎｔｉｃｏｎｖａｌｓａｎｔｉｃ ｒｏｌｅｓ．Ｉｔ ｉＳ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｌｒｃａｔｍｃｎｔ ｏｆ ｃｋｏｍｃｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ，ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ ｐｎｅｕｍｏｎｉｔｉｓ ａｎｄｏ始ｏｆ ｔｈｅｆｉｒｓｔ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｄｒｕｇｓ ｆｏｒａｓｅｐｉｌｅｐｔｉｃ．Ｔｈｅｒｅａｒｅｓｅｖｅｒａｌ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｄｏｓａｇｅ ｍａｒｋｅｔｅｄ ｓｕｃｈｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ｔａｂｌｅｔｓａｎｄ ｃａｐｓｕｌｅｓ．Ｂｕｔ Ｉｔ ｉｓ ｅａｓｙ ｔｏ ｂｒｉｎｇ ｕｐ ｇａｓｔｒｏ／ｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｒａｃｔ ｒｅｌａｐｓｅｓ ｗｈｅｎ ｏｒａｌｌｙａｎｄ ｉｎｌｍｖｅｎｏｕｓｌｙａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ．Ｉｆ Ｉｔ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｆｏｒａｌｏｎｇ ｔｉｍｅ，Ｉｔ ｃｏｕｌｄｃａｕｓｅｓｅｒｉｏｕｓ ａｄｖｅｒｓｅ ｅｆｆｅｃｔｓ．Ｉｔ ａｌｓｏ ｈａｓ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉａｌ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ９００ｄｌｉｐｏｐｈｉｌｉｃ，ｌｏｗｍｅｌｔｉｎｇ ｐｏｉｎｔ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ．Ｓｏ Ｉｔｃ∞ｂｅ ｐｒｅｐａｒｅｄｔｏ ｂｅａｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ ｆｏｒｍｏｆｄｏｓａｇｅ．Ｂｅｃａｕｓｅ ｉｔｓ ｌｏａｄ ｉｓ ｈｉ【ｇｈ ａｎｄ ｍｏｉｓｔ－ｐｒｏｏｆｑｕａｌｉｔｙ ｉｓ ｖｅｒｙ ｇｏｏｄ ｗｉｔｈｏｕｔｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｒｅａｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｔｈｅｃａｔａｐｌａｓｍａｏｆｑ－ＡｓａｒｏｎｅＷａｓｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ ａｎｄ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｆｉｒｓｔ，ｂａｓｉｃ 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吸收。经皮给药是人体接受药物治疗的途径之一，主要是指药物有效成 分通过皮肤吸收进入皮下组织和血液，直接治疗浅表疾病或经血液运送 到全身达到对疾病的治疗目的。近年来，随着新材料，特别是高分子辅 料、新工艺、新设备的不断发展，经皮给药系统理论和促进渗透方法的 研究也取得了很大进展，使更多药物开发成ＴＴｓ制剂成为可能。 经皮给药制剂与其他常用的药物制剂相比有如下特点嘲：使血药水 平较长时间保持在有效浓度范围内：避免药物在胃肠道及肝的首过效 应；改善病人的顺应性，不必频繁给药；提高安全性，如有副作用，容 易及时移去制剂，减少了口服及注射给药不能终止的危险性。药物经皮 吸收主要影响因素有药物的性质，辅料和处方的组成和性质，皮肤的条 件和水分的存在等。 药物经皮给药的关键是改善药物的经皮渗透性。目前改善药物的经 皮渗透性除了离子导入、超声波导入、电致孔、微针导入等物理方法 外，还有经皮渗透促进剂、脂质体、微乳、气雾剂等化学方法。但这些 技术仍处于萌芽阶段，还有待于深入研究。 ２巴布剂简介 巴布剂是以水溶性高分子化合物和亲水性物质为基质，与药物混匀 后涂布于织布上的外用制剂。一般地说，巴布剂载药量大，通常厚度为 １毫米，贴膏面积为６ｘ １０平方厘米，含膏量不少于１１克，它的组成 有底材（支持体），膏体（基质和主药）和衬垫。 巴布剂于六七十年代源于日本，是中药制剂的一种，目前已有很多 产品上市。巴布剂的基质原料包括黏着剂、保湿剂和填充剂等，由于主沈阳药科大学硕士学位论文前言要是亲水性物质，所以它对皮肤具有生物相容性、亲和性、透气性、耐 汗性，重复揭扯性也好，且不易引起过敏，与其它贴膏相比，有明显的 优势。《日本药典》在第八版以后的解说书中均已收载高岭土巴布剂， 但依然存在膏体稳定性差、内聚力欠佳，易污染衣物等缺点。７０年代 后期随着聚丙烯酸钠被应用于巴布剂基质，解决了巴布剂制备的内聚力 不强，黏弹性不够，保湿性差等难题。我国对巴布剂的研究起步于８０ 年代初期，但由于原料、设备、制备工艺等原因，目前巴布剂在新产品 开发及市场占有率方面远未形成规模。对巴布剂的研究应主要考虑以下 几个方面：巴布剂的基质原料的研究；巴布荆的基质配方的研究：透皮 促进剂的筛选与开发；制备工艺的研究；质量评价。对巴布剂的基质配 方的研究是巴布剂研究的基础，配方合理与否，是能否制备出好的基质 膏体的关键。对巴布剂制备工艺的研究的主要内容是基质成型工艺和制 剂成型工艺。选择适宜的透皮促进剂以增加透皮吸收也是经皮给药制剂 研究最多、最广的实验方法，随着研究的深入，可供选择的透皮促进剂 越来越多，实验证明二组分透皮促进系统对药物渗透有较好的协同作 用。我国已上市的巴布剂品种有限，如复方紫荆巴布剂、氟比洛芬巴布 剂等等，但仍然存在粘性较差、工艺欠佳等缺点，在原材料的选择、工艺条件优化、处方筛选等方面需做进一步的研究。好的巴布剂应具有良好的粘附性（克服内聚力），又应具有一定的保型性（具有内聚力）， 同时具有良好的透皮性。３ａ细辛脑简介 ａ细辛脑（Ⅱ一Ａｓａｒｏｎｅ），又名Ⅱ细辛醚，化学名为２．４．５一三甲氧基丙烯基苯，分子式为Ｃ．挪。。魄，分子量为２０８．２５，微黄色针状结 晶，熔点６１＂（３，不溶于水，溶于乙醇，乙醚，氯仿，脂溶性极强。结构式为６鲨里塑型查兰堕主兰垡堡主ＣＨ３０ＣＨ３０Ｈ３ｄ细辛脑口服吸收迅速，１５分钟可达峰，血浆蛋白结合率为６１ ％，可迅速分布于肝、肾、胆汁及心、脑、肺、脾等脏器，绝对生物利 用度极低，胶囊为２．７３％，片剂为５．５６％，半衰期长为３～４小时，个 体差异大，表观分布容积为１２６ Ｌ／ｋｇ。 ａ细辛脑具有镇咳、祛痰、平喘作用，临床用于治疗慢性支气管炎，慢性阻塞性肺病。具有镇静抗惊作用，】ｌ笛床用于抗癫痫，是初发癫痫患者首选药之一。除此之外还有降压、降脂ｍ、利胆作用。通过对Ⅱ 细辛脑的毒理学研究发现ａ细辛脑小鼠口服ＬＤ。为４１７．６ ｍｇ／ｋｇ，腹腔 注射Ｌ‰为３１０ ｍｇ／ｋｇ，实验表明ｎ细辛脑对鼠伤寒沙门氏菌ＴＡ９８有致 突变作用嗍。当剂量大于１８２．５ ｍｇ／ｋｇ时产生致畸作用蛳。 ｎ细辛脑国内现有剂型有注射剂、片剂、胶囊。 ４课题的提出 综上所述，ｎ细辛脑的生物利用度低，及长期给药造成严重的毒副 作用大大限制了ｎ细辛脑的临床应用，但考虑ａ细辛脑具有脂溶性好、 熔点低、分子量小等特点，适于制成经皮给药制荆。又由于巴布剂容量 大，载药量大，基质具有良好的保湿性，易使角质层软化，有利于药物 透皮吸收，且无过敏反应。因此本文研制了ｎ细辛脑巴布剂并考察了其 体外经皮渗透性，家兔局部用药后的药物动力学参数，并对其进行了质 量评价。７沈阳药科大学硬士学位论文本文的内容包括以下几部分：前言 第一章ｎ细辛脑基本理化性质的考察 ａ细辛脑体外经皮渗透性的研究 ｑ细辛脑巴布剂的研制与质量评价 家兔局部用药后的药物动力学研究第二章第三章第四章结论８沈阳药科大学硕士学位论文第一章以Ⅲ辛脑基本理化性质的考察第一章ａ一细辛脑基本理化性质的考察药物的基本物理化学性质决定了它在皮肤内的转运速度，因此对药物一些基本性质如溶解度、分配系数等的考察是对药物渗透性进行研究的基础．也是进一步开展药物处方设计和筛选的依据。在本部分实验 中，我们对ｎ细辛脑在水、生理盐水和２０％７，醇生理盐水中的溶解度、 油水分配系数进行了测定。 １材料与仪器 ａ细辛脑生理盐水 乙醇广西柳州制药厂 沈阳志鹰制药厂０３１２１２ 沈阳金驰集团酒业有限公司０３０７２５ 北京瑞利分析仪器公司ＵＶ－９１００紫外分光光度计ＤＦ―ＩＯＩＢ集热式恒温加热磁力搅拌器巩义市英峪予华仪器厂制造 微孔滤膜０．４５ ｕ Ｉｌｌ油膜 ２分析方法的建立 本实验中ｎ细辛脑的含量测定采用紫外分光光度法 ２．１测定波长的选择 江苏汉邦科技有限公司９些堕堕型查兰堡主堂竺丝塞ｒｉｍ波长范围内进行紫外扫描，结果如下：苎二兰竺塑主堕苎查里些壁堕塑耋窒配制适宜浓度的ａ细辛脑的２０％乙醇生理盐水溶液，在２００―４００９ＰＥＣＴＩ划Ｍ／地Ａｓｕ踞￡趋ＥＮＬＡＲＧＥ／ＲＥＤｕＧＥｔ。一２．８８８１．８８８ｒｉ－８．：２６５Ｆｉｇ ２－１ Ｔｈｅ ＵＶ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆａｓａｒｏｎｅ图２－１ Ｃｔ细辛脑的紫外扫描图谱结果表明ｑ细辛脑在２５８ ｒｉｍ和３１３ ｎｍ处有最大吸收，实验中我们 选择３１３ ｎｍ测定ａ细辛脑溶液的吸收度。 ２．２标准曲线的绘制 称取Ⅱ细辛脑适量，用９５％Ｆ，醇溶解，配成ｌ ｌＢｇ／ｍｌ的溶液，然后 用水稀释成１０，２０，３０，４０，５０，６０ｎｇ／ｍｌ的溶液，在３１３ ｎｍ处测定吸收度Ａ，以浓度对吸收度Ａ作图，绘制标准曲线，得回归方程为Ａ＝Ｏ．０１１５Ｃ＋０．１４６６（Ｒ。－０．９９９５）Ｔａｂ ２．－Ｉ Ｔｈｅ ｄａｔａ ｏｆｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｂｓｏｒｐ６０ｎ Ａ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｉｎ ｗａｔｅｒ１０沈阳药科大学硕士学位论文第一章十细辛脑基本理化性质的考察０?《爱０．０２０４０６０８０Ｃ（ｕｇ／ｍｔ）Ｆｉｇ ２－２ Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅｆｏｒ ８．３Ⅲｒｏｌｌｅ ｉｎ ｗａｔｅｒ图２－２口细辛脑水溶液的标准曲线同上操作，用生理盐水稀释成不同浓度的ａ细辛脑溶液，在３１３ ｎｎｌ处测定吸收度Ａ，以浓度对吸收度Ａ作图，绘制标准曲线，得回归方 程为ｈ＝０．０１２４ Ｃ＋０．１５１９（Ｒ２＝０．９９９９），线性范围为１０～６０ＩＩ ｇ／ｍｌ；再 用２０％乙醇生理盐水稀释成不同浓度的ａ细辛脑溶液，在３１３ ｐ．ｍ处测 定吸收度Ａ，以浓度对吸收度Ａ作图，绘制标准曲线，得回归方程为ｈ＝０．０４０６Ｃ―Ｏ．００４６（Ｒ毡０．９９６８），线性范围为ｌ～３５ＩＩ ｇ／ｍｌ。２．３分析方法的确证 ２．３．１回收率的测定 按照标准曲线的测定方法配制高、中、低三种浓度约ｎ细辛脑水溶 液，在３１３ ｉ２［ｆｌ处测定吸收度Ａ，测定３次，由标准曲线方程计算ｄ细 辛脑浓度，由计算值与真实值的比值计算回收率。Ｔａｂ ２－２Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ａｃｃｕｒａｃｙ（ｎ－３）沈阳药科大学硕士学位论文第一章∞细辛脑基本理化性质的考察同上操作，配制高、中、低三种浓度的ｎ细辛脑生理盐水溶液和ａ 细辛脑２０％乙醇生理盐水溶液，测定吸收度计算回收率。结果均大于９７％。２．３．２日内精密度的测定 取另外配制的高、中、低三种浓度的ａ细辛脑水溶液，同一天分别 于早、中、晚各测定一次吸收度Ａ，计算回收率和日内相对标准偏差。Ｔａｂ ２－３ Ｔｈｅ ｒ∞ｏｖｅｒｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｂｒｗｉｔｈｉｎ－血ｙ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ（ｎ＝３１同上操作，配制高、中、低三种浓度的ａ细辛脑生理盐水溶液和Ｑ细辛脑２０％乙醇生理盐水溶液，测定吸收度计算回收率。日内相对标准偏差均小于３％。 ２．３．３日间精密度的测定 取另外配制的高、中、低三种浓度的ｎ细辛脑水溶液，连续三天分 别测定吸收度Ａ，计算回收率和日问相对标准偏差。Ｔａｂ ２－４ Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｂｅｔｗｅｅｎ－ｄａｙｐｒｅｃｉｓｉｏｎ（ｎ＝３）Ｃ（Ｉｌ ｇ／ｍ１）１０ ４０ ６０Ａｖｅｒａｇｅ ９７．４ ９９．８ ９８．９Ｒｅｃｏｖｅｒｙ（％）ＲＳＤ（呦２．５７ １．６５ １．１６同上操作，配制高、中、低三种浓度的ｎ细辛脑生理盐水溶液和ｎ 细辛脑２０％乙醇生理盐水溶液，测定吸收度计算回收率。日间相对标 准偏差结果均小于３％。些里堕登查堂堕主兰垡丝塞３实验方法 ３．１水中溶解度的测定苎二兰竺塑兰坚查矍堡丝堕塑耋塞取过量的ａ细辛脑置于具塞的锥形瓶中，加重蒸水３０ ｍｌ，恒温３２４－０．５℃，磁力搅拌３００ ｒｐｍ，在第４８ ｈ滤除未溶的固体，用０．４５ｕｍ微孔滤膜过滤，取滤液２ ｍ１加重蒸水稀释至１０ ｍ１，在紫外分光光度 计上以重蒸水为空白，在３１３ ｒｉｍ处测定吸收度。 ３．２生理盐水中溶解度的测定 取过量的ｎ细辛脑置于具塞的锥形瓶中，加生理盐水３０ ｍ１，恒温 ３２４－０．５℃，磁力搅拌３００ ｒｐｍ，在第４８ ｈ滤除未溶的固体，用０．４５ ｌｌｍ微孔滤膜过滤，取滤液２ ｍｌ加生理盐水稀释至ｌＯ ｍｌ，在紫外分光 光度计上以生理盐水为空白，在３１３ ｎｍ处测定吸收度。３．３２０％７ｒＪ醇生理盐水中溶解度的测定 取过量的ｎ细辛脑置于具塞的锥形瓶中，加２０％乙醇生理盐水３０ｍ１。恒温３２＋０，５℃，磁力搅拌３００ ｒｐｍ，在第４８ ｈ滤除未溶的固 体，用０．４５ Ｉｔｍ微孔滤膜过滤，取滤液１ ｍｌ加２０％乙醇生理盐水稀 释至１００ ｍ１，在紫外分光光度计上以２０％乙醇生理盐水为空白，在 ３１３衄处测定吸收度。 ３．４油／水分配系数的测定 衡量药物亲脂性最常用的方法是测定药物的油水分配系数（Ｐ）， 其数学表达式０１为降ｄ ｏ／ｏｗ（２一１）其中ａ Ｏ为油相中药物的活度，ａ ｗ为水相中药物的活度。 如果药物在两相中浓度比较稀，则可以用浓度来代替活度，式２一ｌ可以另写为Ｐ＝－Ｃｏ／Ｃｗ（２－２）其中ｃｏ为油相中药物的浓度，ｃｗ为水相中药物的浓度。药剂中常用体 积百分比。沈阳药科大学硕士学位论文第一章ｐ细辛脑基本理化性质的考察实验中，因为油相和水相体积相等，故在药物分配达到平衡时 Ｃｏ＝Ｃｗ匍一Ｃｗ即油相中药物浓度为水相中药物浓度测定前后的差值。式２－２可以写为Ｐ＝Ｃｏ／Ｃｗ＝（Ｃｗ韧一Ｃｗ）／Ｃｗ（２－３）式２－３用于实验中油水分配系数的计算，即正辛醇中Ｑ细辛脑的量以水 相中Ⅱ细辛脑减少量来表示，Ｐ值求对数得到ＬｏｇＰ值。取５ ｍ１的正辛醇（用水饱和２４ｈ）和５ｍｌａ细辛脑的２０％乙醇生理盐水溶液（４００ｌＩ ｇ／ｍ１），恒温３２±Ｏ．５。Ｃ，磁力搅拌３０００ ｒｐｍ，在 第２４ ｈ后混合物离心（５０００ ｒｐｍ）１５ ｍｉｎ，取水层在紫外分光光度计上以２０％７，醇生理盐水为空白，在３１３册处测定吸收度。计算药物浓度，代入式２―３求出ｎ细辛脑的油水分配系数。 ４结果与讨论４．Ｉａ细辛脑的溶解度： ａ细辛脑在水中的溶解度为０．０９２ ｍｇ／ｍｌ，在生理盐水中溶解度为０．０８９ｍｇ／ｍｌ，在２０％乙醇生理盐水中溶解度为０．４６７ ｍｇ／ｍ１，说明ｎ细辛脑在水和生理盐水中溶解度接近，都较小，而在２０％乙醇生理盐水 中溶解度显著增大，说明采用２０％乙醇生理盐水作为接受液将有利于 药物的透皮吸收。 ４。２油／水分配系数 人体表皮细胞膜具有类脂膜的通透性，脂溶性大的易于穿透皮肤伽，一般认为透皮吸收最佳的ＬｏｇＰ‘”大约为２～３。经测定，Ｑ细辛脑的油／水分配系数为１５６．８，ＬｏｇＰ等于２．１９５，正好在最佳的ＬｏｇＰ范 围，说明它脂溶性很强，适于制成经皮给药制剂。１４沈阳药科大学硕士学位论文第二章ａ一细辛脑体外经皮渗透性的研究第二章Ｑ一细辛脑体外经皮渗透性的研究１材料与仪器 ａ细辛脑乙醇广西柳州制药厂 沈阳金驰集团酒业有限公司 沈阳志鹰制药厂 北京市东环联合化工厂 天津博迪化工有限公司 雄性自制０３０７２５ ０３１２１２生理盐水 氮酮油酸 Ｗｉｓｔｅｒ大鼠吼嘶 咖ｍ瓣蚴北京瑞利分析仪器公司玻璃水平扩散池Ｕｖ一９１００紫外分光光度计ＤＦ－１０１Ｂ集热式恒温加热磁力搅拌器巩义市英峪予华仪器厂制造 微孔滤膜０．４５ ２鼠皮的处理 取健康的Ｗｉｓｔｅｒ雄性大鼠（２００～２２０９），断颈处死，立即用剪刀 仔细剪掉腹部的鼠毛，取下皮肤。将剪下的皮肤平铺于干净的玻璃板 上，角质层朝下，用刀片小心剔除皮下的脂肪组织和粘连物，用生理盐 水反复冲洗干净待用。 ３．接受液的选择 为了模拟人体正常的生理环境，应采用生理盐水作为接受液，但由 于ｎ细辛脑水溶性极差，为了保证其漏槽条件，我们采用２０％乙醇生理 盐水作为接受液来加大其溶解度，实验证明ａ细辛脑在２０％乙醇生理盐 水中的溶解度为０．４６７１ ｍｇ／ｍｌ。 ４分析方法的建立４．１ＩＩｍ有机系江苏汉邦科技有限公司ａ细辛脑测定波长的选择１５些塑茎壁奎堂堕圭兰垡兰奎４００苎三皇！二塑主堕箜丛丝垦兰望丝堕！！！Ｌ配制适宜浓度的ａ细辛脑的２０％乙醇生理盐水溶液，在２００舢～ｎｍ波长范围内进行紫外扫描，结果见图３－Ｉ，药物吸收峰在３１３衄和２５８ ｎＩＴＩ。同时将处理好的鼠皮用２０％乙醇生理盐水溶液浸泡１２ 小时，浸泡液用０．４５ｌＩｍ的微孔滤膜过滤，也在２００ ｎｍ～４００咖波长范围内进行紫外扫描。结果见图３－２，将两图进行比较可知：当测定波 长选择在３１３姗处ｎ细辛脑有最大吸收，而鼠皮溶出物在此处几乎无吸收，说明可以用紫外分光光度法在此波长下测定ｎ细辛脑的量ｔＳＰＥＣＴＲＵＭ／地ＡｇＵ她Ｉ！ＮＬＡＲＧＥ／ＲＥＤＵＣＥ豳。ｂ＆９４４２．８８８１．８８８―０＝：２０５Ｆｉｇ ３－１ Ｔｈｅ ＵＶ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆａｓａｒｏｎｖ图３－１。【细辛脑紫外扫描图谱擎然ｉｊ、．。７≮，；ｊ、。‘：＼ｊｔ 。。ｉ，！。｝。ｊ。迈～≮。ｉ４一。＿。～‘；女ｉ。一，缸．《ｏ≮－。¨¨Ｆｉｇ ３－２ ＴｈｅＵＶｓ伽ｍｍｇ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆｔｈｅ ｓｕｂｓｔ粗ｃｅ ｄｉｓｓｏｖｅｄ劬ｍ ｔｈｅｒａｔ ｓｋｉｎ图３－２鼠皮溶出物紫外扫描图谱沈阳药科大学硕士学位论文第二章Ⅱ一细辛脑体外经皮渗透性的研究４．２标准曲线的绘制 精密称取ｎ细辛脑标准品，溶解于适量９５％乙醇中，并用２０％ 乙醇生理盐水溶液稀释得到０．Ｉ、１、２、３、４、５Ｉｌ ｇｍＬｌ的溶液，以２０％乙醇生理盐水溶液为对照品，分别在３１３ ｆｉｒｅ处测定其吸收度值 （Ａ），以吸收度为纵坐标对浓度Ｃ（ＩＩ 为参０．０３８２Ｃ＋０．００６ｉＪ ｇｇｍＬ－１）作图，得标准曲线方程４（胙０．９９９１）。表明在０．１～５关系。ＩｌｌＬ。的范围内Ｑ细辛脑浓度与吸收度有良好的线性Ｔａｂ３－Ｉ Ｔｈｅ ｄａｔｅ ｏｆｃｏｎｃｅｊⅡＩｒａｔｉｏｎ ａｎｄ曲ｓｏｒｂａｎｃｅ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｉｎ ２０％ａｌｃｏｈｏｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｌｉｎｅ ｆｏｒ ｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅＣ（Ⅱｇ ｍＬｌ）０．１Ａ ０．００９１ ０．０４３２３ ０．１２３４５ ０．１９６０．０８６０．１５８Ｏ．２５ Ｏ．２ Ｏ．１５ Ｏ．１ ０．０５ ０ ０ ２ ｄ ６Ｃ（ｕｇ／ｍ１）Ｆｉ９３－３Ｔｈｅ ｓｌａｎｄｍ＇ｄｃｕｒｗ ｏｆａ＆ｕ＇ｏｎｅ ｉｎ ２０％ａｌｃｏｈｏｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｌｉｎｅ图３―３ ａ细辛脑在２０％乙醇生理盐水溶液中的标准曲线４．３分析方法的验证 ４．３．１回收率的测定１７沈阳药科大学硕士学位论文第二章ｑ一细辛脑体外经皮渗透性的研究按照标准曲线的测定方法配制高、中、低三种浓度的ｎ细辛脑２０％乙醇生理盐水溶液，在３１３ Ｉ＇ｌＩＩｌ处测定吸收度Ａ，测定３次，由标准 曲线方程计算其浓度，由计算值与真实值的比值计算回收率。Ｔａｂ３－２Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｆｏｒａｃｃｕｒａｃｙ（ｎ＝３）４．３．２日内精密度的测定 取另外配制的高、中、低三种浓度的ｄ细辛脑２０％乙醇生理盐水 溶液，同一天分别于早、中、晚各测定一次测定吸收度Ａ，计算回收率 和日内相对标准偏差。Ｔａｂ ３－３ Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｗｉｔｈｉｎ－ｄａｙｐｒｅｃｉｓｉｏｎ（ｎ；３）０?Ｉ ２ ５９８．７ ９８．３ ９８．９１．４２ １．６１ １．４６４．３．３日间精密度的测定――取另外配制的高、中、低三种浓度的ｄ细辛脑２０％乙醇生理盐水ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ（ｎ＝３）溶液，连续三天分别测定吸收度Ａ，计算回收率和日间相对标准偏差。Ｔａｂ ３－４ Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｂｅｔｗｅｅｎ－ｄａｙ２ ５９８．６ ９８．９１．４４ １．１３１８沈阳药科大学硕士学位论文第二章ａ～细辛脑体外经皮渗透性的研究由上可知，紫外分光光度法用于ｄ细辛脑体外经皮渗透性的考察可 行． ５渗透促进剂的筛选 皮肤对大多数药物来说是难以渗透的屏障，其中表皮中的角质层性 质是药物透皮吸收的主要屏障“”，所以寻找适当的促进药物渗透皮肤的 方法是开发透皮给药系统的关键。目前常用的方法有物理促渗法和化学 促渗法，本实验采用化学促渗法。 渗透促进剂是指能可逆地改变皮肤角质层的屏障功能，又不损伤皮 肤活性细胞的化学物质““，理想的渗透促进剂应无药理活性、无毒、无 刺激性、无致敏性，与药物、基质、皮肤有良好的相容性，无嗅无味。目前应用种类很多，如亚砜类、吡咯酮类、月桂氮唑酮、脂肪酸及其酯类、醇及多元醇等等。本实验选择１％氮酮，３％氮酮，５％氮酮，５％油酸 及氮酮：油酸：３；７‘１２３进行筛选。 ６实验方法６．１ａ细辛脑饱和溶液的配制 称取ａ细辛脑标准品１．００３ ｇ，加９５％乙醇１５ ｍＬ使之溶解，用滴管滴加蒸馏水，边滴边摇，直到析出少量沉淀，静置３分钟不溶解， 即得ａ细辛脑的饱和溶液。 ６．２方法 药物的经皮渗透实验中，一般来说药物的经皮渗透是以零级动力学 进行的，扩散符合Ｆｉｃｋ扩散定律，Ｊｓ＝ｄＱ／ｄｔ＝Ｐｓ（Ｃｄ―Ｃｉ），（３－１） 其中Ｊｓ为渗透速率，Ｐｓ为渗透系数，Ｃｄ为供给池药物浓度，ｃｉ 为接受池药物浓度，当供给池为药物的饱和溶液，接受池药物浓度很 低，即ＣＯ）ｌＯＯＣｉ时，可忽略Ｃｉ，式３―１可写成Ｊｓ＝ｄＱ／ｄｔ＝Ｐｓ Ｃｄ（３―２：）些旦垫型查堂堡主堂垡堕壅件，随时补充接受液，这时ｎ－Ｉ塑三兰！：塑主堕堡塑丝壅塑望竺塑翌塞因为经皮入血的药物随时被血流带走，为保证实验条件下的漏槽条Ｃｎ＝Ｃｎｉ＋Ｖｏ／Ｖ∑Ｃｐｓ百（３－３）其中Ｃｎ为校正浓度，Ｃｎｉ为测定浓度，Ｃｐｓ为取样前药物的测定浓 度，Ｖ。为取样体积，Ｖ为接受液体积。那么，Ｑｎ＝Ｃｎ ＶＩＡ （３－４）其中Ｑｎ为时间内单位面积的累积渗透量。Ａ为有效释放面积，本 实验Ａ为２．５４平方厘米。ｃｄ为４６７．１ｐｇⅢＬ１６．２．１ｕ细辛脑饱和溶液的经皮渗透实验按本章介绍的方法制备鼠皮，取处理好的鼠皮用２０％乙醇生理盐 水溶液冲洗，固定于水平扩散池的两个半池之间，角质层面向供给池， 供给池中加入１０ ＩＩＩＬⅡ细辛脑饱和溶液，接受池中加入２０％乙醇生理盐 水溶液１０ ＪⅡＬ，将扩散池置于ＤＦ－１０１Ｂ集热式恒温加热磁力搅拌器中， 调节水温至３２±Ｉ＇Ｃ，搅拌子转速２００ ｒ／ｒａｉｎ，分别于２、４、６、８、ｌＯ ｈ取出接受池中的溶液，同时补加２０％乙醇生理盐水溶液１０ ＪⅡＬ，将取 出的样品用０．４５ ｕｍ的油膜过滤，取滤液１ ｍＬ置２５ ＩｎＬ容量瓶中，加 ２０％乙醇生理盐水溶液至刻度，再取该溶液２．５皿Ｌ稀释至２５ｍＬ即 得。以２０％乙醇生理盐水溶液作对照，在３１３ Ｄ．ｍ处测吸收度。为了 减少误差，消除鼠皮的个体差异，每个样品重复做三次，计算累积渗透 量Ｑ，以时间为横坐标，累积释放量为纵坐标。得ａ细辛脑的累积渗透 曲线，见表３―５和Ｆｉｇ３－４。沈阳药科大学硕士学位论文第二章ａ一细辛脑体外经皮渗透性的研究Ｔａｂｌｅ ３－５ Ｃｏｍｅ！ａ精ｖｅ ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ口．Ⅸ，Ｌｒｏｎｅ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅｐｏｉｍｓ（ｎ＝３）０ ２４０ ０．０１５ ０．０５５ ０．４４３ ０．９２００ ０．０１７ ０．０６４ ０．４７７ ０．９４３ １．５３３Ｏ ０．０１４ ０，０５１ ０．４３９ ０．９８６ １．３４６００．０１５０．０５７ ０．４５３ ０．９５０ １．４２２０．１５４ ０．６７３ ２．０９１ ３．３５３ ６．８３２６ ８ １０１．３８７１．５勺口一１３ ０．５０ ０ ５ ｉ０ １５、Ｔ（ｈ）Ｆｉｇ３－４ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｏＬｔｒｅｏｆⅡ．ａｓａｒｏｎｅ ｓａｔｕｒａｔｅｄｓｏ啪∞图３－４ｎ细辛脑饱和溶液经大鼠皮肤的累积渗透曲绒６?２?２皮肤经不同透皮促进荆作用后ａ细辛脑饱和溶液的经皮扩散 先在供给池中加入一定浓度的促渗剂，接受池中加入２０％乙醇生 理盐水溶液１０ ｍＬ，置于ＤＦ＿１０ｌＢ集热式恒温加热磁力搅拌器中，调节 水温至３２±ｌ℃，２小时后倾出两池液体，用蒸馏水反复冲洗干净，２ｌ沈阳药科大学硕士学位论文第二章ａ一细辛脑体外经皮渗透性的研究再于供给池中加入１０ｍＬｑ细辛脑的饱和溶液，接受池中加入２０％乙醇生理盐水溶液，再按６．２．１操作，测定ａ细辛脑的饱和溶液的透皮情况。计算累积渗透量Ｑ，以时间为横坐标，累积释放量为纵坐标，得ａ细辛脑的累积渗透曲线，见表３－６～３一１０和Ｆｉ９３―５～３―９．沈阳药科大学硕士学位论文第二章ａ一细辛脑体外经皮渗透性的研究Ｔｈｂｌｅ ３－６ Ｃｏｍｕｌａｆｉｖｅ ｔｒａｎｓｃｕｔａｌｌｅｏｕｓ ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｌｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ １％ａｚｏｎｅ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔｓｒｎ－－３）ｎ－ａｓａｒｏｎｅｗｉｔｈ ｔｈｅ飞／ｈ０ ２‰ｆｍｇ．ｃ蠢０ ０．３８５ １．４３５ ２．８９２ ４．０８９瓴｝咀ｇ．ｃ畦ｚ０ ０．４７４ｌ埘珏ｌｇ．ｃ莳０ ０．５００ Ｉ２ ４ｑ｝Ｉｎｇ，ｃ毋０ 仉 Ｌ ＆ＳＤ钻３ 心２｝２ ２仉 Ｌ Ｌ 乱∞３ 霆； ｌ 筠９ ∞４舒５ 鹋８掩６ｎ６２４ 虬０ ５．２３１％３ｔ 协４ ５．１７９１０５．３４２４．９６４６．８０８６急４３口≥２００５１０１５Ｔ（ｈ）Ｆｉｇ ３－５ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｐｅｒｃｎｔａｎｅｏｕｓ ｃｕ糟ｏｆ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ １％ａｚｏｎｅ ｓａｔｕｒａｔｅｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅａ－ａｓａｒｏｎｅ图３－５ ａ细辛脑饱和溶液经１％氪酮处理的大鼠皮肤的累积渗透曲线沈阳药科大学硬士学位论文第二章ａ一细辛脑体外经皮渗透性的研究Ｔａｂｌｅ ３．７ ＣｏｍｕｌａｔｉＶｅ ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆｄ－ａ．女ｕ＇ｏｎｅｗｉｔｈ ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ３％ａＺＯｉｌｅ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔｓ（ｎ＝３）、／ｈ０２ ４０，／ｒａｇ．ｃ寸０２／ｍｇ．ｃｄ０ ０．５７４ １．３４２ ２．７８６ ４．４４９ ６．０２１ ０ ０．５９７ １．８７２ ２．８３２ ４．３９３ ６．３０１Ｑｓ／ｍｇ．ｃｍ－２强‰ｇ．ｃ毋０ ０．４５５ １．３０７ ３．０５８ ４．９４９ ６．２１８ ０ ０．５４２ １．５０７ ２．８９２ ４．５９７ ６．１８０ｓＤ０．７６２ ３．１６６ １．４５６ ３．０６１ １．４３８６８１０一备ｏ、县口０ ５ ｉ０１５Ｔ（ｈ）Ｆｉｇ ３－６ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｔｅａＵｎｅｎｔ ｏｆ６１１１＂ｅｏｆⅡ－ａｓａｒｏｎｅ ｓａｔｕｒａｔｅｄ ｓ０１ｍ｝。ｎ ｗｉｔｈ出ｅ３％ａｚｏｎＢ图３－６ ａ细辛脑饱和溶液经３％氮酮处理的大鼠皮肤的累积渗透曲线沈阳药科大学硕士学位论文第二章ｎ一细辛脑体外经皮渗透性的研究Ｔａｂｌｅ ３－８ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｔｒｆｌｎｓｃｕｔｓｎｅｏｕｓ ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ５％ａｚｏｎｅ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅａ－ｆｌＳｌＬｒｏｎｇｗｉｔｈ ｔｈｅｐｏｉｎｔｓ（ｒ１＝３）一警。＼箸一口０ ５１５Ｔ（ｈ）Ｆｉｇ ３－７ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｃｔｌｌ≈ｏｆｎ－ｏｓａｒｏｉｌｅｓａｔｕｒａｔｅｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ５％ａｚｏｎｅ图３－７ ｃｃ细辛脑饱和溶液经５％氪酮处理的大鼠皮肤的累积渗透曲线沈用药科大学硕士学位论文第二章ｎ一细辛赫体外经皮渗透性的研究ｃｏｎｔｅｎｔＴ曲ｌｅ ３－９ＣｏｍｕｌａｔｉＶｅ ｔｒａｎｓｃｕｌａｎｅｏｕｓ ｄｉｍｌｓｉｖｅｏｆａ－ａｓａｒｏｎｅｗｉｔｈ ｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ５％ｏｌｅｉｃ ａｃｉｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｔｉｍｅｐｏｉｎｔｓ（ｎ＝３）飞／ｈ０ ２ ４ ６ ８ １０Ｑ－／ｍｇ．ｃ寸Ｑ，／ｍｇ．ｃｄ３埘ｌｎ孚．ｃ毋Ｑ／ｍｇ．ｃｍ－Ｚ０ ０．９９６ ２．５６２ ３．８７６ ５．２１０ ６．６９８ ０ ０．９６０ ２．１３３ ３．３７６ ４．９８９ ６．２７６ ０ ０．８９４ ２．０４９ ３．８６０ ４．８３１ ６．０６１ ０ ０．９５ ２．２４８ ３．７０４ ５．０１０ ６．３４５ＳＤ０．５１７ ２．７０５ ２．８４２ Ｉ．９０４ ２．１３６８譬６釜４苫２０ ０５１０１５Ｔ（ｈ）Ｆｉｇ ３－８ Ｃｏｍｕｌａｆｉｖｅ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｃｕ糟ｏｆａ．船ａ∞ｎｅ ｓａｔｕｒａｔｅｄ ｓｏＩｕ妇ｏｎ ｗｉｍ ｔｌｌｅｌｍａｔｍｅｎｔ ｏｆ５％ｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ图３－８Ⅱ细辛脑饱书溶液经５％油酸处理的大鼠皮肤的累积渗透曲线婆堕堕整盔兰堡主兰垡堡壅Ｔａｂｌｅ ３－１０ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆｍｉｘｔｕｒｅ（ｏｌｅｉｃ蔓三兰！二塑主堕签丛丝堡登堕壁塑翌塑一 Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｔｒａｎｓｃｕＭｃ：ｏｔｉ￥ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ａ－８￥ａｒｏｎｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅａｃｉｄ：ａｚｏｎｅ＝７：３）ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ ｐｏｉｎｔｓ（ｎ＝３）０ ２４０ ０．４６５ Ｉ．９８５ ３．６７２ ４．９９３ ７．１９６０ ０．５４４ １．９９８ ３．７９２ ５．２０１ ７．１１２０ ０．３５０ ２．０４４ ３．７９２ ４．８３６ ６．９０８０ Ｏ ４ ２ Ｏ ３ ７ ５ Ｏ ７ Ｏ 驺∞匏ｍ记 ０ ９７６ ３ ｌ ２ ９３ １ ８３ ｌ １ ４８ ｌ６ ８ １０一警ｕ／暑粤口０５１０１５Ｚ（ｈ）Ｆｉｇ ３－９ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｃｕｒｅｏｆａ－８５ａｒｏｎｅ ｓａｔｕｒａｔｏｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅｔａ＇ｅ．蚰ｖｎｔ ｏｆｍｉｘｔｕｒｖ（ｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ：ａｚｏｎｖ＝７：３）图３－９ ａ细辛脑饱和溶液经二组分系统（油酸：氲酮一７：３）处理的大鼠皮肤的累积渗透曲线７数据处理 我们将ａ细辛脑的累积渗透曲线中间几个数据进行直线回归，与时 间轴的交点即为Ｔ－。（滞留时间），应用公式３―２～３―４计算出Ｊｓ（渗透速率）、Ｐｓ（渗透系数）来评价药物经皮渗透性的大小““”１。并根据沈阳药科大学硕士学位论文第二章ａ一细辛脑体外经皮渗透性的研究ＥＲ＝ＪＪＪｏ（Ｊｏ为ｎ细辛脑饱和溶液的渗透速率，ＪＢ为经促渗剂处理后， Ⅱ细辛脑饱和溶液的渗透速率），求出增渗比（ＥＲ），见表３－１１Ｔａｂｌｅ ３－１ １ Ｔｒａｎｓｏｕｔａｎｅｏｕｓ ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｆ ｎ－丛ａｒｏｎｅ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｎｈａｎｃｅｒｓ由表３―１ｌ可看出：不同的促渗荆及浓度的差异对药物的经皮渗透 作用不同，大鼠表皮经３％氮酮处理后，能够显著提高药物的Ｊｓ和Ｐｓ和透皮总量，而５％油酸则显著缩短药物的Ｔ。我们采用二组分系统（油酸：氮酮＝７：３）时，能最大程度提高药物的Ｊｓ和Ｐｓ和透皮总 量，滞留时间由３．８６小时缩短到０．５７小时。８．讨论：氮酮是通过增加角质层类脂流动和溶解皮肤的类脂来增加药物的透皮吸收““，油酸与皮肤的脂肪酸有类似的结构，易于渗入角质层结 构，二者合用，既有较强的透皮吸收促进作用，又可明显缩短滞露时 间，效果明显。因此，在制备巴布剂时，我们选用二组分系统（油酸： 氮酮＝７：３）作为促渗剂。沈阳药科大学硕士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价第三章ａ细辛脑巴布剂的研制与质量评价本章根据原料的性质进行了基质配方的优化，确定了以混合胶液为 基质，热熔法制各巴布剂，并考察了巴布剂的制备工艺流程，以正交实 验筛选了巴布剂的最佳处方，并对巴布剂的经皮渗透性、黏性、稳定性 和刺激性进行了考察。 １材料与仪器卡波普９４０ＣＭＣ沈阳药科大学药剂实验室提供 沈阳化学试剂厂０００８０３ＮＩＰＰＯＮ ＳＨＯＫＵＢＡＩ ＣＯ，ＬＴＤ，ＪＡＰＡＮ，ＬＯＴ ＮＯ，１Ｙ２８Ｓ聚丙烯酸钠皂土上海试四赫维化工有限公司０００４１０ 北京化学试剂公司０００５２３ 上海运佳黄埔制药有限公司０２１ １２２ 沈阳化学试剂厂０２０６１３ 沈阳第一试剂厂０２０６２８ 沈阳正信高科技研究所试剂部０００３２０ 广西柳州制药厂 沈阳金驰集团酒业有限公司０３０７２５ 沈阳志鹰制药厂０３１２１２ 北京市东环联合化工厂００１０１６ 雄性２００－２２０９聚乙烯醇 甘油氢氧化铝三乙醇胺 柠檬酸 Ｑ细辛脑乙醇 生理盐水氮酮 Ｗｉｓｔｅｒ大鼠油酸天津博迪化工有限公司０００３１２ 中国医科大学附属一院外科手术室提供自制新鲜人皮玻璃水平扩散池Ｕｖ一９１００紫外分光光度计北京瑞利分析仪器公司沈阳药科大学预士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布剂的研｛Ｅ｛『与质量评价ＤＦ―ＩＯＩＢ集热式恒温加热磁力搅拌器巩义市英峪予华仪器厂制造 微孔滤膜 ２．基质配方的优化 基质配方的研究是巴布剂研究的基础，配方合理与否，是能否制 各出好的基质膏体的关键“”。 ２．１基质原料的选择 巴布剂的最大特点是它采用的是水溶性基质，因此与皮肤有很好的 相容性、亲和性、透气性，更能使皮肤角质层细胞水化膨胀，有利于药 物的透皮吸收且不易过敏。巴布剂基质由黏性剂、保湿剂、填充剂等物 质组成，巴布剂基质不仅要具有一定的粘性，还应具有可涂展性、均匀 性、柔软性，由于各成分性质不同，在基质中的作用不同，决定了加入 量的差异，所以各成分的合理配比是制成优良基质的关键。在预实验的 基础上，我们选择了对基质黏性影响较大的几种原料为考察对象。它们 是胶液（由几种黏性剂按一定比例制备而成），甘油（保湿剂），固体 物质（填充剂）。 ２．２基质原料的优化： 以上述原料为考察因素，以各种原料的加入量为考察范围，以黏 着力为指标，用正交设计法对各种原料的加入量进行优化。２．２．１实验设计及用量见表４－１Ｔａｂｌｅ ４－Ｉ Ｆａｃｔ０传ａｎｄ ｌｅｖｃＩｓ江苏汉邦科技有限公司，０．４５肛ｍ有机系ｏｆｒｅｃｉｐｅ沈阳药科大学硕士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价２．２．２黏着力的测定方法【１６】：取５ｘ３ ｃｍ２基质贴剂，一端贴于平滑不锈钢板上，另一端用带钩的铁夹固定，于２８～３０℃预热２ ｒａｉｎ，在此温度下，往铁夹挂钩上逐渐 添加砝码，以贴面在３０～６０ Ｓ内掉下时所承受的力即为样品的黏着力， 求出两次测定的平均值。 ２．２．３选择Ｌ９（３３）正交表，依次制各样品并测试黏着力，见表４．２Ｔａｂ ４－２ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆａｄｈｅｓｉｖｅ ｆｏｒｃｅｎｕｍｂｅｒ Ｐｏｌｙｍｅｒｌｅｖｅｌｓ Ｇｌｙｃｅｒｉｎ Ｓｏｌ ｉｄ ｓｕｂｓｔａｎｃｅａｄｈｅｓｉｖｅｆｏｒｃｅｓｏｌｕｔｉｏｎ（ｇ）１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ Ｔ１ １＂２（ｇ）１（２） ２（４）３（６） １（２）（ｇ）（ｇ）１０４１（３） ｌ（３）１（３）１（ｏ．２）２（ｏ．４）４５３（０．６） ３（０．６） １（０．２）７５ １２６ ２８０ １０６ ２２４ １８４ １７５２（５）２（５） ２（５）２（４）３（６）２（０．４）２（０．４）３（８） ３（８） ３（８）２２４ ５１２ ５８３ｌ（２） ２（４）３（０．６）Ｉ（０．２）５５９ ３７５ ３８５ ６１３（６）４５４ ５０９ ３５６ ５１Ｔ为各因素同一水平之和，Ｒ为极差――Ｔ３Ｒ １２０３１沈阳药科大学硕士学位论文第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价２．２．３配方选择根据上表数据进行方差分析，爿因素的Ｆ值为１３９，大于只孟＝９９，说明Ａ因素对黏着力影响极显著，占因素的Ｆ值为４５，大于式未产１９，说明曰因素对黏着力有影响，ｆ因素的Ｆ值为９８，大于甓．。２）一－－１９，说明ｃ因素对黏着力影响显著，按影响大小排序Ａ＞Ｃ＞Ｂｏ根据表２，处方 也埕Ｇ黏着力最大，Ａ－易岛黏着力最小，按照４历岛处方制各样品，测定 其黏着力，平均值为２７５ｇ。３．ｎ细辛脑巴布剂制备工艺 ３．１制备ａ细辛脑巴布剂工艺条件的选择 我们在预实验的基础上，以膏体的均匀性、膜残留性、柔软性、可 涂展性和对皮肤的追随性为考察指标，对搅拌时间、炼合温度和各组分 的添加顺序进行实验研究，对制备ｎ细辛脑巴布剂工艺条件进行优化。 ３．１．１实验设计及用量：Ｔａｂｌｅ ４－３ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆｒｅｃｉｐｅ１ｅｖｅ］ＳＡＢＣ ＯｒｄｅｒＴｉｍｅ（ｍｉｎ）Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ（℃）１ ２ ３１０ ２０ ３０３０――百磊ｉｒ５０（ａ＋ｂ）一ｃ７０ｍ十ｃ）一ａ３．１．２综合指标的评价： 膏体的均匀性：所制成的膏体均匀、细白、无颗粒状胶团。 膜残留性；取成型巴布剂五片，１８０。剥离后残余在聚乙烯薄膜上 的量。些塑堕型盔堂堡圭堂壁望塞笙三童！二垫皇堕里塑型堕型型墨堕量塑！！一柔软性：此项指标为感官感觉打分ａ 可涂展性：用自制涂布器涂布时，抛锚性好，膏体均匀不断条为 佳。 皮肤追随性：将成型巴布剂贴于手腕背部，用力甩１０下不脱落。 以上各项指标均为１分，总分５分，作为综合评定指标。３．１Ｉ３实验安排与结果：Ｔａｂ ４－４ ａｒｒａｎｇｅｍｅｍ ａｎｄ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎ由上表看出处方Ａ，Ｂ２ｃ，的综合指标得分最高，为５分，说明其工艺 条件最佳。因此，在巴布剂的制各过程中采用填充剂先与保湿剂混匀，再与黏性剂和其它物质混匀，搅拌时间为２０分钟，炼合温度为５０℃。否则不易混匀，形成颗粒，同时搅拌速度应慢，接触面积应大，最好在乳钵中制备，尽量避免气泡的出现。我们采用优化的船矗条件，又重沈阳药科大学硕士学位论文第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价复了上述操作，所制各的膏体均匀性、膜残留性、柔软性、可涂展性和 对皮肤的追随性综合评定指标可达到５分，说明此工艺条件可行。３。２ａ细辛脑巴布荆制各的工艺流程 目前，巴布剂的制各工艺主要有三种办法： （１）压延涂布法，适于呈柔性固状体的膏体，采用不锈钢轧轮碾压成型，无须干燥可直接包 装。（２）热熔涂布法，适于具有冷热触变性膏体，加热后有较好的延 展性，涂布后冷却成型。 （３）溶液涂布法，适于具有一定流动性的黏稠液体，涂布后需经适当干燥。 本实验根据原料的性质及制备工艺采用热熔涂布法，取得很好的效果。ｄ细辛脑巴布剂制备的工艺流程如下：先将皂土、氢氧化铝、粉状聚丙烯酸钠、柠檬酸用甘油分散，在５０℃条件下搅拌均匀；称取聚乙烯醇加入适量蒸馏水，８０℃条件下加热使之溶解；同时将药物用９５％ 乙醇溶解，并加入适量的吸收促进剂和表面活性剂，将上述聚乙烯醇 液、甘油分散液和用适当黏性剂配制而成的胶液加入其中，在５０℃条 件下慢速搅拌均匀即可。沈阳药科大学硕士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价Ｆｉｇ ４－１ Ｔｈｅ ｉｌｌｕｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆｐｒｅｐａｒｉｎｇｏ．ａｓａｒｏｎｅｃａｌａｐｌａｓｍａ图４－１Ⅱ细辛脑巴布荆的制备工艺流程沈用药科大学硕士学位论文第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价３＿３讨论：本实验采用的黏性剂是由羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ）、聚丙烯酸钠 （ＰＡＮＡ）、卡波普（Ｃａｒｂｏｐ０１）溶胀后按一定比例混合而成，这样可 以使黏性剂得到充分溶胀，制成的膏体均匀，细腻，易于涂展；由于卡 波普分子中含５６％，－，６８％的羧酸基团，可用无机或有机碱性物质中和，形成凝胶，中和后的０．５％水凝胶在ｐＨ函１０时最粘稠【１７ｌ，本实验用－－－Ｚ＿，醇胺调卡波普的ｐＨ为８￣９，这时卡波普黏性最大；再与前二者以一定 比例混合，最后胶液的ＰＨ值为７左右，既是保持药物稳定的最适宜ｐＨ 值，又适合皮肤给药，避免对皮肤刺激性。在制备工艺条件下，一定保 证慢速搅拌，可避免产生过多的气泡而影响制剂的质量。 ４．ａ细辛脑巴布剂的处方优化 ４．１分析方法的建立 图４－２是空白巴布荆在２０％乙醇生理盐水浸泡１２小时的紫外扫描 图，可知空白巴布剂在Ｑ细辛脑的最大吸收峰３１３ ｎｍ几乎无吸收，而 药物在此处有最大吸收（见第三章图３－１），故确定用紫外分光光度法 在３１３啪处测定药物。４‘’４００，０１．８０ｅ．厂―Ｌ――上｝ｆｉｌｌｅ＋ｅｅ２＾ｏ．７９４ｌ………～…一…～～………～＿ｌ一……～８．５８８０．３８２ 钆１７６。询。。的０Ｆｉｇ ４－２ Ｔｈｅ ＵＶ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｃａｔａｐｌａｓｍａ ｅｘｔｒａｃｔ ｉｎ ２０％ａｌｃｏｈｏｌｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ８ａｌｉ｜－１０图４－２空白巴布剂在２０％乙醇生理盐水中溶出物的紫外扫描图谱沈阳药科大学硕士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价４．２标准曲线的绘制 配制含ｎ细辛脑的２０％乙醇生理盐水溶液，浓度分别为ｌ，５，１５，２５，３５ｕｇ／ｍＬ，以２０％乙醇生理盐水为对照，在３１３ ｎｍ处测定吸收度值（见表４―５），以吸收度值Ａ对浓度Ｃ进行线性回归，得标准曲线Ａ－－０．０４０６Ｃ－０．００４６（Ｒ２＝Ｏ．９９６８）Ｔａｂ ４．５ Ｔｈｅ ｄａｔｅ ｏｆｃｏｎｃｃｎｔｒａｆｉｏｎ ａｎｄ ａｂｓｏｒｂａｎｃｃ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｉｎ ２０％ａｌｃｏｈｏＩ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｌｉｎｅ ｆｏｒ ｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅ１－５ １《 Ｏ．５ ０ Ｏ １０ ２０ ３０ ４０Ｃ（ｕｇ／ｍ１）Ｆ培４－３ Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄＣＵＤ／ｅｏｆⅡ－８ｓａｒｏｎｅ ｉｎ ２０％Ｍｃｏｈｏｌ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓａｌｉｎｅ图４－３ ｏ【细辛脑在２０％ｚ，醇生理盐水溶液中的标准曲线４．３巴布剂的体外释放实验 巴布剂的释放度测定参照２０００版药典规定的桨碟法，自制了释放 装置：把一定量的巴布剂涂于玻璃纸中间（接触面积固定），将玻璃纸 四周提起，将其底部置于２００ｉ ｍＬ２０％乙醇生理盐水中并保持在液面下ｈｕｃｍ，于恒温（３２４－ｌ℃）磁力搅拌条件下，在１，２，４，６，８，１０定时取样５ⅢＬ，同时补加等体积的２０％乙醇生理盐水，样品用０．４５沈酐药科大学硕士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价ｍ的微孔滤膜过滤后，用紫外分光光度法测定其吸收度值，每个处方重 复三次，取其平均值。４．３．１：单因素的确定根据初步单因素的考察结果，药物、增塑剂和吸收促进剂的用量对 巴布剂的渗透有影响，因此考察这三种因素，各因素的安排如下：Ｔａｂｌｅ ４－６ Ｆａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆｒｅｃｉｐｅｌｅｖｅｌｓｌＡ－Ｄｒｕｇ（ｇ）０．０４ ０．０６ ０．０８Ｂ―Ｐｌａｓｔｉｃｉｚｅｒ（ｇ）０．２ ０．４ ０．６Ｃ―Ｅａｈａｎｃｅｒ（ｇ）０．０２ ０．０４ ０．０６２ ３用ｋ（３３）正交表进行处方筛选，按处方依次配制巴布剂，用释放 度来衡量巴布剂的渗透性。（１克的空白基质中）Ｔａｂｌｅ ４－７ Ｔｈｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｅｃｉｐｅ ａｎｄ ｄｉｓＳＯｌｕｔｉｏｎ ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆｏｒｔｂｏｇｏｎａｌ ｄｅｓｉｇｎ№１ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８ ９ＡＢＣ娥１３．５７ １１．３０ １３．３４ １８．３９ １６．７８ １８．６９ １９．５１１（０．０４） １（Ｏ．０４）１（０．０４）１（０．２）３（Ｏ．０６）１（０．０２） ２（０．０４） ２（Ｏ．０４）２（０．４） ３（０．６）１（０．２）２（０．０６）２（０．０６）２（０．４）３（０．６） １（０．２）３（０．０６）ｌ（０．０２） １（Ｏ．０２） ２（Ｏ．０４）２（Ｏ．０６） ３（０．０８） ３（０．０８）２（０．４） ３（０．６）２２．０９ ２７．５０３（０．０８）３（０．０６）３８沈阳药科大学硕士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价处方优化结果处方９的释放度最高，将以上数据用ＳＰＳＳ软件进行 方差分析，结果如下：Ｔａｂ ４－８ Ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆｔｈｅ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ由以上的分析结果可以看出，Ａ因素的ＳＩＧ值小于０．０５，说明百对Ｑ的影响最显著，也就是Ａ是影响药物溶出的主要因素，Ａ越大越有利 于Ｑ的提高，结合巴布剂的黏性和溶出结果，取优化处方测定１０ ｈ的 释放度为２７．１％。图４―４为优化处方的体外释放曲线。可得药物的体外 释放速率为６．８×１０。ｍｇｃｍ－２ｓ一。６飞４、口占２ＯＴｉｍｅ（ｈ）Ｆｉｇ ４－．４ Ｔｈｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｐｒｏｆｉｌｅ ｆｒｏｍＱ－ａ．ｃＲｔｒｏｎｅｃａｔａｐｌａｓｒａａ图４－４经过优化的ａ细辛脑巴布荆的体外释放曲线４．４讨论： 药典规定的桨碟法并不适用于本实验，因为巴布剂基质具有水溶 性，在释放液中呈很大的粘性，不方便测定，本实验自制的测定释放度 的方法简便可行。由于玻璃纸的性能未能考察，可能是造成释放度较低 的主要原因。沈用药科大学硕士学位论文第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研制与堡！塑塑５．ｎ细辛脑巴布剂的体外渗透实验５。１分析方法的建立 分析方法同前，空白巴布剂与鼠皮溶出物和新鲜人皮溶出物（图４― ５）都在３１３咖处几乎无吸收，可采用紫外分光光度法测定ｎ细辛脑的 含量。。１．３９８ ８．７９９Ｂ．５９９０．３９８ ８．１９８－０；９ｅ３Ｆｉｇ ４－５ Ｔｈｅ ＵＶ ｓｃａｎｎｉｎｇｓｐｃｃ舰ｍ ｏｆｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｓｋｉｎ ｅｘｔｒａｃｔ ｉｎ ２０％ａｌｃｏｈｏｌｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ鞠１．ｍｅ图４－５新鲜人皮在２０％乙醇生理盐水中溶出物的紫外扫描图谱５．２实验方法 大鼠全皮的处理方法及接受池中药物浓度的测定方法同前。取预处 理过的鼠皮，用滤纸反复吸干后，在角质层的一面贴上ｎ细辛脑巴布 剂，面积为２．５４平方厘米，然后将鼠皮固定到扩散池上，接受液选用１０ ｌｎＬ２０％乙醇生理盐水溶液，定时倾出全部接受液，同时补充等体积ｕ的空白接受液，样品用０．４５ｍ的微孔滤膜过滤后，用紫外分光光度法测定吸收度并计算ａ细辛脑的含量。实验中由于鼠皮对药物的渗透性 存在个体差异，为了减少误差，本优化处方的经皮渗透实验重复做３次 取其平均值。 人皮肤的处理方法同上。５．３数据处理 体外经皮渗透实验中，接受液中药物的校正浓度ｃｎ同前，累积渗透量的计算公式为：Ｑｎ＝Ｃｎ×Ｖ／Ａ其中Ａ为扩散面积，ｖ为接受液体积，ｃｎ为校正浓度。本实验中Ａ＝２．５４ ｃｍ２，Ｖ＝ｌＯ ｍＬ。５．４实验结果与讨论５．４．１ｄ细辛脑巴布剂经鼠皮渗透实验结果见下表；ｔｒａｎｓｃｕｔａｎｅｏｕＳＴａｂ ４－９ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅｄｉｆｆｕｓｊｖｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆａ－ａｓａｒｏｎｅｃａｔａｐｌａｓｍａ ｔｈｒｏｕｇｈｒａｔｓｋｉｎ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅｐｏｉｎｔｓ（ｎ＝３）以累积释放量对时间作图得回归方程为Ｑ＝０．０５５５Ｔ一 ０．Ｏｔ３２（Ｒｋ０．９９８８，ｕ＝３），说明药物以零级过程渗透皮肤。渗透速率为１．５４Ｘ１０１ｍｇｃｍ－”Ｓ １，远远小于药物的释放速率（６．８×１０１ ｍｇｃｍ－”Ｓ １），可知ａ细辛脑巴布剂中药物的透皮量是由皮肤控制的。４ｌＯ．８ ０．６口０．４０．２０ ０ ５ １０ １５Ｆｉｇ ４．－６ Ｔｈｅ ｐｒｏｆｉｌｅ ｏｆｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ［ｔｓｇｒｏｎｅ ｆｒｏｍ ｃａｔａｐｌａｓｍａ ｔｈｒｏｕｇｈｒａｔｓｋｉｎ（ｎ‘３）图４－６ ａ细辛脑巴布荆经鼠皮渗透图５．４．２ａ细辛脑巴布剂经新鲜人皮渗透实验结果见下表：Ｔａｂ ４－１０ Ｃｏｍｕｌａｔｉｖｅ ｔｍｎ∞ｕｔａｎｅｏｔｌｓ ｄｉｆｆｕｓｉｖｅ ｃｏｎｔｏｎｔ ｏｆｎ－ａｓｓｉ＇Ｏｒｌｅｃａｔａｐｌａｓｍａｔｈｒｏｕｇｈｈｕｍａｎｓｋｉｎｉｎｄｉｆｆｍｆｅｎｔｔｉｍｅｐｏｉｎｔｓ（ｎ＝３）以累积释放量对时间作图得回归方程为Ｑ一０．３５７５Ｔ－０．０９８１（Ｒ２－Ｏ．９９２６，ｎ＝３），说明药物以零级过程渗透皮肤。渗透速率为９．９２×１０。５ｍｇｃｍ－２ｓ～，远远小于药物的释放速率（６．８×１旷ｍｇｃｍｌｓ。），可知ａ细辛脑巴布剂中药物的透皮量是由皮肤控制的。沈阳药科★学碰士学位论文第三章ｄ一细辛脑巴布剂的研制与厦ｔ评价５ ４ ３ａ２１０Ｏ５１０１５ｔ（ｈ）Ｆｉｇ ４－７ Ｔｈｅ ｐｒｏｆｉｌｅ ｏｆｐｅｎｎｅｎｌｔｉｏｎａｓａｒｏｎｏｆｉ＇ｏｍ ｅａｔａｐｌａｓｍａ ｔｈｒｏｕｇｈ ｈｕｍａｎｓｋｉｎ（ｎ－３）图４―７ａ细辛脑已布剂经人皮渗透图６．ａ细辛脑巴布剂的的质量评价６．１ａ细辛脑巴布剂的含量测定６．１．１标准曲线的绘制 配制。细辛脑的９５％乙醇溶液，浓度分别为ｌｌａ ｇ／ｍＬ，５Ｈ ｇ／ｍＥ，１５ｌａｇ／ｍＬ，２５Ｉｔ ｇ／ｍＬ，３５１１ ｇ／ｍＬ，在３１３ ｎｍ处测定吸收度Ａ，以Ａ对浓度作图得标准曲线方程ｈ－－Ｏ．０４５６Ｃ－０．０３３３（Ｒ毡０．９９６１）Ｔａｂ４―１１ Ｔｈｅｄａｔｅ ０ｆｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎａｎｄ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ ｓｔａｎｄａｒｄＣＵＩ＇Ｖｅｏｆ∞锄ｎｅｉｎ９５％ａｌｃｏｈｏｌｆｏｒＣ（１ａ ｇ／ｍＬ）Ａ１ ０．０４２ ０．２０７ ０．５９３２５ １．０８４３５ １．６０１沈阳药科大学硕士学位论文第三章。一细辛脑巴布剂的研制与质量评价１．８１．６ １．４ １．２ １０．８０．６０．４０．２０ＯｌＯ２０３０４０Ｃ（ｕｇ／ｍ１）Ｆｉｇ ４－８ Ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄｃｕｒｖｅｏｆａ―ａｓｓｌ＇ｏｒｌｅｉｎ ９５％ａｌｃｏｈｏｌ图４－８。【细辛脑在９５％乙醇溶液中的标准曲线６．１．２Ｕ细辛脑巴布剂中ｎ细辛脑的含量测定方法取巴布剂一片，撕去防粘层，置５０ⅢＬ烧杯中加入适量９５％乙 醇，５０Ｘ２以下使其充分溶解，并分次转移至１００ ｍＬ容量瓶中，摇匀静 置１０分钟，取上清液ｏ．５吨用９５％乙醇稀释至２５ ｍＬ，在３１３ ｎｍ处 测定Ａ，求出ｎ细辛脑的含量。结果如下Ｔａｂ ４－１２ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｉｎ ｃａｔａｐｌａｓｍａ量（） 力ｕ／ｘ．ｇ０．０５９５ ０．０５９７ ０．０５９２测得量（ｇ）０．０５９１ ０．０５９４ ０．０５８７含量（％）９９．２５ ９９．５７ ９９．２０平均值（％广―面――一１．３５ ９９．３４ １．０９ １．２９精峦称取不同量的ｑ细辛脑对照品，加入处方量的辅料，按上述方 法测定，由加入量与测得量计算回收率，结果如下；沈阳药科大学硕士学位论文第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价Ｔａｂ ４－１３ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ａｓｓａｙ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｃａｔａｐｌａｓｍａ主药测得０．０７７６量（ｇ） 回收率（％）９８．４８０．０７８７０．０５９２０．０６０８０．０３８８０．０４０６９８．５６９９．６３ｉ０１．８２９８．９３１００．９９６．１．４日内精密度的测定 称取ｄ细辛脑４０ｍｇ，６０ｍｇ，８０ｍｇ，按处方量加入辅料，制成Ⅱ细辛 脑巴布剂，分别在同一天的早，中，晚按上述方法测定ｎ细辛脑的含 量，计算ＲＳＤ。结果如下：Ｔａｂ ４－１４ Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｗｉｔｈｉｎ－ｄａｙｐｒｅｃｉｓｉｏｎ（ｎ＝３）６０ ８０９８．２ ９８．６１．３９ １．１４称取ｄ细辛脑４０ｍｇ，６０ｍｇ，８０ｍｇ，按处方量加入辅料，制成Ⅱ细 辛脑巴布剂，分别在第一，二，三天按上述方法测定ｎ细辛脑的含量， 计算ＲＳＤ。结果如下：Ｔａｂ ４－１５ Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｍ＇ｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｂｅｔｗｅｅｎ－ｄａｙ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ（ｎ＝３）Ｍ（ＩＩＩｇ）ＡｖｅｒａｇｅＲｅｃｏｖｅｒｙ“）ＲＳＤ （％）６０ ８０９８．３ ９７．８１．６４ ２．０２４５沈阳药科大学硕士学位论文 ６．２第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研翻与质量评价ｎ细辛脑巴布剂的黏力测定实验： 粘性也是评价巴布剂质量的重要指标，好的巴布剂既要有一定的粘着力（克服内聚力），又要有一定的内聚力（不易在皮肤上残留）。根 据本实验室条件，我们进行了巴布剂的黏着力实验“”、赋形性实验“”、内聚力实验。６．２．１黏着力实验： 我们参照２０００版药典，选择直径为６ ｍｍ和６．３衄的钢球（重量 均符合规定），检测了３批巴布剂的黏着力，结果均能牯住钢球。说明 本巴布剂符合黏着力要求。 ６．２．２赋形性实验： 我们参照２０００版药典，检测了３批巴布剂的赋形性，结果膏面均 无流淌现象，说明本巴布剂符合赋形性要求。 ６．２．３内聚力实验： 内聚力是影响巴布剂黏力的主要因素之一，因此我们增加了内聚力 实验。方法如下；将巴布剂切割成５ Ｘ ３ｃｍ的小块，揭去防黏层后贴于 垂直悬挂的不锈钢板上，在其下端与不锈钢板平行方向挂一２００克的砝 码，记录其脱落的时间。Ｆｉｇ ４－９ Ｔｈｅ ｔｖｓｔ ａｐｐａｒａｔｕｓ ｆｏｒ ｄｖｔｅｒｍｉｎｉｎｇ ｃｏｈｅｓｉｏｎ ｏｆｃａｔａｐａｓｍａ图４．９测定巴布剂内聚力的实验装置沈阳药科大学硕士学位论文第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研制墨重量竖丝Ｔａｂ ４－１６ Ｄａｔａ ｏｆｔｈｅ ｃｏｈｅｓｉｏｎ ｔｅｓｔ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｃａｔａｐｌａｓｍａＮｏ．１２３Ｔｉｍｅ（ｍｉｎ）１８．２５±１．７６１７．６３±１．９７２０．７８±２．０３６．３Ｑ缅辛脑巴布剂的初步稳定性考察 药物制剂的基本要求是安全、有效、稳定。研究药物制剂的稳定性的任务就是探讨影响药物制剂稳定性的因素及提高稳定化的措施，制定 药物制剂的有效期，保证产品质量。本实验依据２０００版药典的药物制 剂稳定性实验指导原则ｏ”，对ａ细辛脑巴布剂的基本性状、含量和黏着 力的稳定性进行了考察。 ６．３．１巴布剂稳定性的影响因素考察 按３．２项下方法制备巴布剂三批，用小袋密封包装，测定黏着力， 再分别置于高温（４０℃），高湿（Ｒｆｆ７５％），低温（冷冻）及光照条件 下，于５天、１０天取样，与０时样品比较，考察其基本性状及黏着力。６．３．２加速实验 按３．２项下方法制备巴布剂三批，用小袋密封包装，置于４０Ｅ：、 ＲＦｌ７５％条件下。分别于１、２、３、６月取样观察测定，并与０时样品比 较。评价指标…为‘＋’为黏性好， ６．３．３室温留样实验 按３．２项下方法制备巴布剂三批，用小袋密封包装，放置于普通药 品柜中保存，相对湿度ＲＨ４８～７８％，室温为１８～３０℃，分别于３、６、 ９、１２月取样观察测定，并与０时样品比较。 ‘一’为黏性差， ，０’为无黏性。沈阳药科大学硕士学位论文第三章ａ－ｍ辛脑巴布荆的研制与质量评价６．３．４实验结果 巴布剂稳定性的影响因素考察实验分别于５天、１０天取样，与０ 时样品（黏着力为２８０）比较性状与黏着力，结果如下：Ｔａｂ ４－１ ７ Ｔｈｅ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎＯｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｃａｔａｐｌａｓｍａ高湿（Ｒｔｔ７５％） 低温（冷冻）光照胶膏状２７５ ２７０ ２８０胶膏状 胶膏状 胶膏状２８０ ２７５ ２７５胶膏状 胶膏状Ｔａｂｌｅ ４－１８ Ｔｈｅ ｏｂｓｅｒｖｍｉｏｎｏｎａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｃａｔａｐｌａｓｍａ掰号怼勰ｔ局）Ｏ ｌ舔观―――奄运■焉了――两微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂ｍ．０３０５０８１２ ３ ６ Ｏ ｌ灿 眦 邮 薹； 叭 刚９ ２ ８ ９４４０３０５０８２２ ３ ６ｍ■吣 邮ｊ；４８沈阳药科大学硕士学位论文第三章Ⅱ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价０ １ ０３０５０８３ ２ ３ ６微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂１００．４＋９９．３９８．９ ９６．５ ９７．３＋＋＋＋由表４―１８可以看出，在温度４０±２℃条件下放置６个月，巴布剂的外 观、含量、粘着力均无明显变化。ＴａＢｌｅ４－１９ Ｔｈｅ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｎｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｔｅｓｔｉｎｇ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ｃａｔａｐｌａｓｍａ批号０３０５０６１时间（月）０ ３ ６ ９ １２外观 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布；ｆｌｊ 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂 微黄色巴布剂含量（％）９８．７ ９５．９ ９８．６ ９７．８ ９６．９ ９８．４ ｉ００．４ ９８．３粘着力＋＋＋＋＋０３０５０６２０ ３ ６ ９ １２＋＋＋９６．３９５．８ １０２．４ １００。３ ９６．ｇ ９８．５＋＋０３０５０６３０ ３ ６ ９＋＋＋＋沈阳药科大学硕士学位论文第三章ｎ一细辛脑巴布剂的研制与质量评价由表４―１９可以看出，在室温条件下放置１２个月，巴布剂的外观、含 量、黏着力均无明显变化。６．４ｎ细辛脑巴布剂的皮肤刺激性实验６．４．１实验方法：取健康家兔３只，实验前２４小时将脊柱两侧剔毛， 每侧面积约４Ｘ６ ｃｍ２，左侧涂巴布剂，右侧作为无处理对照区。 ６．４．１．１一次涂药皮肤刺激性实验 涂药后２４小时用温水洗净药物和基质，于去除受试物后ｌ，２４， ７２小时观察其皮肤刺激反应。 ６．４．１．２多次涂药皮肤刺激性实验 将家兔背部左侧涂巴布剂，一次／ｄ，连续７天，最后一次涂药后 ２４小时用温水洗净药物和基质，于去除受试物后１，２４，７２小时观察 其皮肤刺激反应。 ６．４．２皮肤刺激反应评分标准“ｏ及皮肤刺激强度评分标准叫１见下表：Ｔａｂ．４－２０ Ｓｔａｎｄａｒｄｓｃｏｒ船ｏｆ碱ｔａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｋｉｎ刺激性反应 分值红斑：无红斑０轻微红斑ｌ ２ ３中度红斑 严重红斑紫红色红斑并有焦疤形成４ 水肿：无水肿０ 勉强可见 可见边缘高出周围皮肤 皮肤隆起ｌ哪轮廓清楚ｌ ２ ３水肿隆起１咖并范围扩大４沈阳药科大学硕士学位论文第三章ａ一细辛脑巴布荆的研制与质量评价Ｔａｂ．４－２１ Ｔｈｅ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ ｏｆｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｉｃｉｎ强度 无刺激性 轻度刺激性 中度刺激性 强刺激性 ６．４．３实验结果与讨论Ｔａｂ ４?２２ Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｋｉｎ分值＜０。５ ＜２．０９ ＜６．０ ＞６．０由上表可见家兔一次性或多次涂用ａ细辛面百希嗣后＿『两栗丽红斑、水肿等皮肤刺激反应，说明该ｎ细辛脑巴布剂是安全的。兰竺苎翌查竺堡主竺壁丝兰苎塑兰！二塑圭堕里塑塑竺塞垄塑塑垫塑竺堕！Ｌ第四章ａ细辛脑巴布剂的家兔药物动力学研究１实验材料与仪器 １．１实验仪器 ＬＣｌ０ＡＴ高效液相色谱仪 ＳＰＤ－１０Ａ检测器 ＴＧＬｌ６Ｇ台式高速离心机 ＹＫＨ．ＩＩ型液体快速混合器 １．２试剂与药品 乙腈 乙醚 四氢呋哺 乙酸钠 消炎痛 ｄ细辛脑巴布剂 ｎ细辛脑胶囊 １．３实验动物 家兔 ２分析方法的确定 ２．１标准液的配制２．１．１ＳＨＩＭＡＤＺＵ ＳＨＩＭＡＤＺＵ上海医用分析仪器厂 江西医疗器械厂色谱纯天津康科德科技有限公司０４０２０５色谱纯天津康科德科技有限公司０３０８２０色谱纯天津康科德科技有限公司０４０２０３ 分析纯天津博迪化工有限公司０２０３０８ 自制自制自制２０００９～２５００９ｑ细辛脑标准液的配制 精密称取１０５℃干燥恒重的ｄ细辛脑置于ｌＯＯｍｌ容量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，得标准储备液（２００“ｇｈｎｌ）．精密吸取０．５ｍｌ标准储备液用乙腈稀释为２５ｍｌ，得标准药品溶液（４ｐｇ／ｍ１）备用。苎里塑翌查兰璺圭兰竺兰兰２．１．２内标（消炎痛）标准液的配制苎竺兰！二塑主堕璺塑型塑塑塑垫塑兰！！！Ｌ精密称取１０５＂Ｃ－Ｔ燥恒重的消炎痛置于ｌＯＯｍｌ容量瓶中，用乙腈溶解定容，摇匀，得标准储备液（１００１＾ｇ／ｍ１）．糟密吸取０，５ｍｌ标准储备 液用乙腈稀释为２５ｍｌ，得标准内标溶液（２ｐｙｍｌ）备用。２．２血样处理及测定方法 取全血置涂有肝索的离心管中，离心１０分钟（３０００－－ ５０００ｒｌｍｉｎ），取上清液即得血浆，精密吸取血浆０．２ｍｌ置带塞试管中， 加入标准内标液Ｏ．Ｉｍｌ，加乙醚２ｍｌ提取２次，旋涡振荡５ｍｉｎ，离心 １０分钟（３０００－－５０００ｆ／ｒａｉｎ），合并两次上滑液移至另一尖底试管， 置３５＇Ｃ水浴锅，Ｎ２气吹千。残渣用１００Ｉ．ｔｌ甲醇溶解，取２０ｕ．１进样， 测得主药与内标峰面积之比。 ２．３液相条件 流动相： 醋酸盐缓冲液：乙腈：四氢呋喃＝４０：６０：５ （醋酸盐缓冲液的ＰＨ为４．５）∞Ｊ 色谱柱： 流速： 检测波长： 柱温： 迸样量： ２．４分离度及专属性 精密吸取空白血浆０．２１１１１置带塞试管中，加入标准药品溶液Ｏ．Ｉｍｌ， Ｃ１８柱（２５０ｘ４．６ｍｍ。Ｓｐｏｒｅ）０．８ｍｌ／ｍｉｎ３１３ｒｉｍ室温２０１Ａ１标准内标液Ｏ．１－１１，加乙醚２ｍｌ提取２次，旋涡振荡５ｍｉｎ，离心１０分钟（３０００－－５０００ｆ／ｒａｉｎ），合并两次上清液移至另一尖底试管，置３５＂Ｃ水浴锅，Ｎ２气吹干。残渣用１００｝．１１甲醇溶解，取２０ｍ进样，测得主药 与内标峰的保留时间分别为１１．４２５ｍｉｎ和８．３５５ｍｉｎ，分离度为１．５０３和沈阳药科大学硕士学位论文第四章ａ一细辛脑巴布剂的家兔药物动力学研究５．９４３。主药的理论塔板数为８７２４，由上可见方法的专属性好，无干扰。（２）＆ａ虹二－Ｌ。一．～△．’。－。Ｔ’。。１’’’１。。‘’Ｐ’‘‘ｒ’。‘＇。。。。ｒ）５１０幅越葛∞葛ｔ（ａｉ丑）伸盈ｒ――ｉ――■ｒ――ｉ―ｔ０１ｉｎ）ｔ（Ｉｉ ｎ）Ｆｉ９５－－１ＩｎｔｅｒｎａｌＨＰＬＣＣｈｒｏｕｍｔｏｇｍｍｏｆ（Ｚ）ＢｌａｎｋＰｌａｓｍａ（２）．ＢｉｎＰｌａｓｍａＳｐｉｋｅｄｗｉｔｈＳｐｉｋｅｄ ｗｉｔｈＳｔａｎｄａｒｄ（３）Ｂｌａｎｋ Ｐｌａｓｍａａｓａｒｏｎｅ（４）Ｐｌａｓｍａ ｓａｍｐｌｅ鬈Ｉｎ佃ｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄｂ：越耻咖ｂ：。【细辛脑图５－１８ＰＬＣ图谱（１）空白血浆（２）空白血浆＋内标（３）空白血浆＋ｑ细辛脑 （４）血荣样品ａ：内标２．５标准曲线取５份０．２ｍｌ空白血浆，分别加入ｎ纽辛脑标准液配制成浓度分别 为０．０５，Ｏ．Ｉ，０．２，Ｏ．５，１，２肛ｇ／ｍ］的含药血浆，分射加入Ｏ．１ｍｌ的内 标液，然后按“２．２”方法处理后进样，求ａ细辛脑与消炎痛峰面积沈阳药科大学硕士学位论文第四章ｎ一细辛脑巴布剂的家兔药物动力学研究比。以蜂面积比值为纵坐标，以待测物浓度为横坐标傲线性回归，得回归方程为ｙ－－４．４７５ｘ＋０．３９４４（Ｒ２＝０．９９５４），标准曲线见图５－－２Ｔａｂｌｅ ５－１ Ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｉｏｏｆｐｅａＩ【ａ娜１０ ８ ６ ４ ２ ０ ０ ０．５ １ １．５ ２ ２．５Ｃ（ｕｇ／ｍ１）Ｆｉｇ ５－２ Ｓｔａｎｄａｒｄｂ＇ＲＵ＇ＶＯｏｆａｓａｒｏｎｅｉｎ Ｂｌａｎｋ Ｐｌａｓｍａ圈５－２ａ细辛脑家鬼血药浓度标准曲线由上可见，血浆中Ｑ细辛脑浓度在０．０５～２“咖ｌｌ范围内线性关系良好。 ２．６方法学验证 ２．６．１提取回收率 配制低，中，高三种浓度（Ｏ．０５，Ｏ．５，２ｐ．ｇ／ｍ１）的含药血浆各三 份，按“２．２”方法处理后进样，同时配制同浓度的药液，加等量内标 液，不加血浆进样，比较二者的峰面积比值。沈阳药科大学硕士学位论文第四章ａ一细辛脑巴布剂的家兔药物动力学研究Ｏ．７０３ Ｏ．０５ ０．６９９ Ｏ．７２３ ３．１６２ Ｏ．５ ２．９８７ ２．９９８ ９．０１２ ２ ９．１５９ ９．３９７Ｏ．６３２ Ｏ．６１５ Ｏ．６２９ ２．７８３ ２．６０１ ２．６６３ ７．８３２ ７．９９８ ８．３０９８９。９０ ８７．９８ ８７．００ ８８．Ｏｌ ９７．０８ ８８．８３ ８６．９ｌ８８．２９±１．４７１．６７８７．９７±０．８８１．００８７．３２８８．４２８７．５５±０．７８０．８９２．６．２方法回收率取９份空白血浆０．２ｍｌ，分别加入一定量的标准储备液，配成浓度分别为０．０５，０．５，２ Ｈ ｇ／ｍ１的含药血浆各三份，分别加入Ｏ．１ｍｌ的内标 液，然后按“２．２”方法处理后进样，求峰面积比。代入标准曲线，计算ｎ细辛脑的浓度，计算量与加样量的比值为加样回收率，结果见表５－－３沈用药科大学硕士学位论文第四章ｎ一细辛脑巴布剂的寒兔药物动力学研究１．曲Ｉｅ５－３ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆｍｅｔｈｏｄ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ（ｎ＝０）０．０４６ Ｏ。０５ ０．０４８ Ｏ．０４６９２ ９６ ９２ ９６ ９２ ９４ ９４．５ ９０．５ ９５９３．３３±２。３０９２．４７Ｏ．鹋Ｏ．５ ０．４６ Ｏ．４７ １．８９ ２ １．８ｌ １．９０９４．００士２．０００２．１３９３．３３±２．４７２．６４实验结果表明，低，中，高三种浓度的含药血浆平均加样回收率均 大于９０％，回收率符合方法学要求。 ２．６．３精密度实验 配制低，中，高三种浓度的含药血浆，处理后进样，批内三份， 同一天测定，批闯３份，分别在１，２，３天测定，结果见表５－－４Ｔａｂｌｅ ５－４ Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ｏｆｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆａｓａｒｏｎｅ（ｎ＝３）（１ｌ ｇ／ｍ＿１）ＣＳＤＲＳＤＣＳＤＲＳＤ（１．ｔ ｇ／ｍ１）（％）（％）（ｕｇ／ｍ１）（％）（％）Ｏ?５ ２０．４５４０．０１２ ０．０２Ｏ．３４０．４８９ １．９８５０．６７１．３７２．０１３１．２５Ｏ．４６０．２３垫里苎型查竺里圭竺垒兰兰３．体内药动学研究３．１实验方法 ３．１．１实验设计塑坚兰！＝塑圭堕璺！塑塑塞垒苎塑垫垄！兰！堕健康家兔４只，体重（２０００～２５００９），用药前禁食１２小时，两次 用药间隔７天，单剂量自身交叉口服ａ细辛脑胶囊（含ｑ细辛脑 ０．４９）和外贴ｎ细辛脑巴布剂（含口细辛脑０．４９，面积为６０ｃｍ２，重量 为ｌｌｇ），给药方案如下；Ｔａｂｌｅ ５－５ ＥｘｐｅｒｉｍｅⅡｔ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆｒａｂｂｉｔｓ３．１．２给药与采血 口服给药：将口细辛脑０．４９装子胶囊中给药，给药后分别在 ０．２５、０．５、０．７５、１、１．５、２、３、４、６、８、１２ｈ从耳缘静脉取血，离 心后取血浆置－２０＂Ｃ冰箱中储存待用。 透皮给药：在家兔背部经去毛处理后的皮肤上贴～块面积为６０ｃｍ＝ 的ａ细辛脑巴布剂，在给药后１、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、 ２０、２４、２８、３２、３６、４０、４８ｈ从耳缘静脉取血，离心后取血浆置＿２０ ℃冰箱中储存待用。 ３．１．３血样分析与数据处理 在各时间点所取的样品血浆中，按“２．２”方法处理后进样，求Ｇｔ 细辛脑与消炎痛峰面积比。代入标准曲线，计算。细辛脑的浓度。兰塑堕型查竺里主堂竺堡苎Ｔａｂ｜ｅ苎竺兰！二塑童堕璺塑型竺兰苎苎塑壁塑兰竺墅一３．Ｉ．３．１口细辛脑胶囊的药物浓度数据５－６Ｄａｔａｏｆｃｏｎｃ蜊ｔｒａｆｉｏｎｏｆｃａｐｓｕｌｅｏｆ．ｓｉｎ－ｏｎｅ（ｈ）１――――矿一―ＦＤ（１‘ｇ／ｎ１１）１．５逗 ∞ｏ１３ ０．５０Ｏ ５Ｔ（ｈ）Ｆｉｇ５－３Ｍｅａｎ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎ∞ｎｔｒａｔｉｏｎ－ｔｉｍｅ ｃｌＨｖ鼯ｏｆｃａｐｓｕｌｅｏｆａｓａｒｏｎｅａｆ渤’ｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ圉５－３ ａ细辛脑腔囊利在家兔体内血药浓度时间曲线图婆翌堕型查塑主堂垒丝皇３．Ｌ ３．２Ｔａｂｌｅ ５７ Ｄａｍ苎婴兰！二塑兰堕墨塑型堕塞垒蔓塑塑垄堂！堕【＿０细辛脑巴布剂的药物浓度数据ｏｆｃｏｎ删ｏｎ０．０６５６０．１０９３ ０．２１３５ ０．２２４７ ０．２０２３ｏｆｃａｔａｐｌａｓｍａ ｏｆａｓａｒｏｎｅ１ ｏ ｏ ｏ ８０．０９３３０．１１８２０．０８７８０．１０５７ ０．１８５４ ０．２１１９０．０７０９ ０．１４２０ ０．１４２２ ０．１４７７０．０７９４ ０．１１８８０．２２９７０．２４９３ ０．２５４３０．１７１６０．２０８４０．１７８４０．１８９２０．１１８２０．１８６７ ０．１７３００．１８８３０．１８７９ ０．１７９９０．１８８８０．１８６９０．１８２１ ０．１６２７ｍ地０．１７７８０．１８８ｌ０．１８６７Ｍ０．１７羽０．１７３９０．１６５７ ０．１７５４０．１７２５ ０．１７８６ ０．１７２８ ０．１６１３ ０．１３１８ ０．１１０４ ０．０７２５ ０．０５２６ ０．１９４７０．１７５４ ０．１８０２ ０．１６６６０．１７４２ ０．１６８２ ０．１６９７ ０．１５３９ ０．１２６００．１８７２０．１７３２ ０．１６４５０．１７１５０．１６８６０．１７６９０．１５７９０．１７５９ ０．１５７９ ０．２０６６ ０．１４６５ ０．１２０２ ０．０９４６ ０．０８３７ ０．０６０惦塘约毖 孔 想０．１６８７０．１５４２ ０．１４９１０．１６７６０．１４５２ ０．１５８７０．１２１８０．１３０２ ０．１０２３０．０７７５匏弘０．１０２７０．０７８７ ０．０５９４０．１０２５０．０７８１ ０．０５６３∞粥０．０５３２沈阳药科大学硕士学位论文第四章ａ一细事脑巴布剂的寨兔药均动力学研究Ｏ．２５―０．２ 迥０．１５耋０．１ ｕ０．０５ＯＯ ２０４０６ＵＴ（ｔ）Ｆｉｇ ５－４ Ｍｅａａ ｐｌａｓｍａ ｃｏｎｃｅｎｔｎｔｆｉｏｎ－ｔｉｍｅｃｕｒｖｅｓｏｆｃａｔａｐｌａｓｍａ ｏｆａｓａｒｏｎｅ ａｆｔｅｒｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ翻血ｎｉｆＩｉ：ｎ础伽国５－４ ｎ细辛脯巴布剂在家兔体内血药浓度时间曲线圈３．２家兔体内药动学参数 对四只兔子的血药数据用３Ｐ９７软件处理，结果见表５．８。利用梯 形法计算ＡＵＣｏ．ｔ，并由下式计算ＡＵＧ．。，公式如下：ＡＵＣ０４＝Ｃ＊／Ｋ ｃ?为实测最后一点血药浓度，Ｋ为消除速度常数，由最后５点的血药浓度的对数值与时间作图。根据斜率求出Ｋ值。由口细辛脑巴布剂的药物 浓度数据求得最后５点血药浓度的对数值与时间作图，得标准方程为ＬｏｇＣ＝－０．０２３Ｉｔ４＂Ｏ．０８０４１Ｒ２＝０．９９０１），Ｋ值为０．０５３２，求得ＡＵＣ．ｓ…同理，求得ａ细辛脑胶囊的标准方程为ＬｏｇＣ＝－０．０４４６ｔ－Ｏ．８４０８（Ｒ２－－０．９９７６），Ｋ值为Ｏ．１０２７，求得ＡＵＣｕ…由公式ＡＵＣｏ．。＝ＡＵＣｏ－ｔ＋ＡＵＣｔ。求算ＡＵＣ¨，结果见下表：Ｔａｂｌｅ ５－８ Ｔｈｅ ｐｈａｎｎａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｏｆａｓａｍｎｅ ｃａｐｓｕｌｅ ａｎｄ ｃａｔａｐｌａｓｍａｃａｐｓｕｌｅ２．３０００７，１５３８０．４９．８１．２９８７ ０．１９２６电翻ｊ§一面西爵ＦＯ．０８８６ ７．８２３４ｃａ切科姗ａ６ｌ沈阳药科大学硕士学位论文第四章４一细辛脯巴布剂的家兔药钧动力学研究３．３相对生物利用度 根据下面公式计算Ⅱ细辛脑胶囊和ｎ细辛脑巴布剂的相对生物利用 度， Ｆ％一ＡＩＩｃ（巴布剂）＊ｄｏｓｅ（胶囊剂），ＡＵＣ（胶ｔ剂）＊ｄｏｓｅ（巴布剂） 通过计算得到ｎ细辛脑巴布剂的相对生物利用度为３１１．０３％ ４讨论：４．１本文采用家兔为模型动物，并以ｎ细辛脑胶囊为参比制剂，进行了ｎ细辛脑巴布剂家兔体内药动学研究，结果表明ａ细辛脑巴布剂的生物 利用度明显高于胶囊剂。相对生物利用度为３ １ １．０３％，可见巴布剂这一 剂型对ａ细辛脑的吸收和利用是较为有利的。 ４．２本试验选用自制的ａ细辛脑胶囊作为参比制剂，服药方便，但家兔 作为口服制剂的模型动物，分析结果还有待于进一步研究。４．３ｎ细辛脑口服生物利用度极低，究其原因可能是口细辛脑是脂溶性很强的药物，水溶性差、吸收不好或为肝的首过效应，而口细辛脑巴布荆可以提高ｎ细辛脑的生物利用度，还可以避免肝的酋过效应，降低药物的毒剐作用，具有一定的临床意义。４．４透皮制剂的特点就是使药物在较短的时间内达到有效浓度，并维持 恒定释放，本实验结果表明Ⅱ细辛脑巴布剂释药恒定，但如何选择适宜的给药剂量还需进一步考察，以保证其血药浓度尽快保持在有效范围 内，更好地发挥疗效，并降低其毒副作用。沈用；ｉ科大学硕士学位论文全文结论全文结论ｑ细辛脑（ｎ－Ａｓａｒｏｎｅ）是天南星科植物石菖蒲的主要有效成份之 一。具有显著镇咳、祛痰、平喘和镇静抗惊厥作用，由于口服生物利用 度低，且长期给药，易造成严重的毒副作用，使其临床应用受到很大限 制。巴布剂不仅具有容量高，载药量大，良好的保湿性，不易引起过敏反应的特点，而且可大大降低其毒副作用，因此本文研制并考察了ｎ细辛脑巴布剂。本文首先测定了ａ细辛脑的基本理化性质，测得Ⅱ细辛脑在２０％乙醇生理盐水中的溶解度为０．４７ｍｇ／ｍｌ，Ｑ细辛脑的ｌｏｇＰ（正辛醇／水）等 于２．１９５，适于经皮给药。然后采用水平扩散池，以２０％乙醇生理盐水为接受液，考察了ｎ细辛脑的经皮渗透性质，并对五种促渗剂进行了筛 选，结果表明ｎ细辛脑约经皮渗透为零级过程，稳态流量（ＪＤ和渗透系数（Ｐｓ）均较小，分别为０．０６０３ Ｉｌ ｇｃｍ－＝ｓ’１和１．３７ｃｍｓｌ，滞后时间为 ３．８６ｈ。五种促渗剂均有促进透皮吸收作用，采用促渗剂（氮酮；油酸 ＝３：７）时，能够使药物的Ｊｓ增加到０．２７２８ ｊｌ ｇｃｍ‘ｓ～，使Ｐ。提高到 ５．８４ｃｍｓ～，增渗倍数职为４．２８倍，滞后时间缩短至０．５７ｈ。本文采用正交设计法对巴布剂的基质、制备工艺进行了优化，采用热熔法制备巴布剂；并采用正交设计法，以体外释放度为考察指标，对 巴布剂的配方进行优化选择；并参照２０００版药典，对ｎ细辛脑巴布剂 进行了质量评价，各项指标均符合规定。结果表明ａ细辛脑巴布剂稳 定，刺激性小。本文考察了ｎ细辛脑巴布剂经离体鼠皮肤和离体人皮肤的渗透性。渗透速率（Ｊｓ）分别为１．５４