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冬季吃羊肉小心“布鲁氏杆菌”
时间： 15:49:24
来源：羊城晚报 点击：23次
日前，一则“新型病毒SK6致多人死亡且羊肉不能吃”的说法让不少人对羊肉有了“畏惧”，这一说法被证实是谣言。昨晚，广东省疾控中心的官方微信号发出消息，提醒市民：吃羊肉还要小心“布鲁氏杆菌”。
广东省疾控中心传染病预防控制所邓爱萍主任医师说，人感染了“布鲁氏杆菌”会得“布鲁氏病”。
布鲁氏病是由布鲁氏杆菌属引致的传染病。这些细菌主要感染牛、狗、猪、绵羊和山羊等动物。因工作需要而接触到受感染的动物或动物组织的人员，如屠宰场员工、肉类加工员、兽医和实验室工作人员等，感染布鲁氏菌病的风险较高。一般是通过接触而感染，经破损的皮肤粘膜感染是布鲁氏杆菌最主要的传播方式。因为在病羊的组织、血、尿、阴道分泌物、流产胎羊尤其胎盘中，含有大量的布鲁氏菌，如果处理的时候正好皮肤有破损又没戴手套，就极有可能中招。
专家表示，布鲁氏病常见的症状有发热、乏力、多汗、食欲不振、肝脾处淋巴结肿大、全身肌肉和大关节疼痛等。
邓爱萍提醒，一般人感染布鲁氏杆菌的机会并不多，但如果有人“追求原生态”而饮用未经消毒的生羊奶，或者“追求口感鲜嫩”而吃未熟的羊肉，就很容易中招。
本文关键词：羊肉 布鲁士杆菌
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时间： 19:28:10
动物医学进展２（｝０２年第２３卷第２期（总第儿８期）布鲁氏菌鉴定和检测方法研究进展雷连成－，陈伟２综述王兴龙－ 审校（１解放军军需大学动物科学系，吉林长春１３００６２；２．新疆塔里木农垦大学动物科技学院．新疆阿拉尔８４３３ｎｏ，中图分类号：ｓ８５５．９文献标识码Ａ文章编号：１００７一ｊ咄８（：Ｏｆ）：）０２一¨０２：０３摘要：布鲁氏茵是重要的人畜共患病病原菌， 其鉴定和检测方法受到国内外的普遍重视。本 文对近年来布鲁氏菌ＤＮＡ同源性及其内切酶 图谱分析、血清学检测、ＰＣＲ扩增、核酸探针杂 交等鉴定、检测方法进行了综述，并展望了分子 生物学技术在布鲁氏菌快速、准确鉴定、检测中的艮好前景。清学检查所得的结果均符合犬种布鲁氏菌的特性．为 我国地方茁种的检定提供了一个新的方法“。Ｊ９８９年 内蒙古地方病研究所郭秀兰等用细菌Ｉ）ＮＡ分子热变 性法和ＤＮＡ液相分子杂交法测定了布鲁氏菌６个种 １８个生物型ＤＮＡ分子基因，Ｔｍ值为７６．９～７７．９Ｃ，Ｇ＋Ｃ ｍ０１％为５６．１～５８．６。结果符合布鲁氏菌文献报道，证明这一技术是可靠的〔３〕。１ ９９３年中国药品生物 制品检定所王晓英等以国际标准布鲁氏菌菌种为对 照，对国内外实验室参考菌种１４株及地方疑难菌种儿 株结合常规方法进行了ＤＮＡ（；十ｃ ｒｎ０１％测定，同时 以羊种菌Ｍ１６ ＤＮＡ为标准，与布鲁氏菌所有种和型 的２４个代表株及８株地方疑难菌种进行了ＤＮＡ～ ＤＮＡ杂交测定．布鲁氏菌及地方疑难菌种的Ｇ＋Ｃ ｍｏｊ％值范围为５４．１～５９．３．Ｍ１６株与布鲁氏菌参考 菌种的杂交率８１．７％～１０９％．与地方疑难菌种的杂 交率除一株为７２．１％外．其余为８４．２吖～１０９‰．届高 度同源，鉴定为布鲁氏菌一“。布鲁氏茁ＤＮＡ同源性研 究的开展，对该菌的鉴定和分类具有重要意义。２关键词：布鲁氏茵；鉴定；检测布鲁氏菌是人畜共患布鲁氏菌病的病原菌。该病 在世界各国广泛流行．严重危害人类健康和畜牧业发 展．而且还被国外列为生物战剂之一。该病受到各国政 府及医学、兽医学工作者的高度重视，积极开展了有关 科研工作。特别是该病多发地区和国家，对其研究内容 较多而且深入。布鲁氏菌分为猪、牛、羊、犬、绵羊、沙林 鼠６个种，由于不同种之问流行特点、免疫原性、致病 性等均有较大差异，因而准确检测该病一直是国内外 学者广泛关注并集中研究的课题，更是布病的诊、检、 防以及反生物战防护环节中十分关键的技术。近年来。 随着分子生物学技术的发展、完善，为细菌分类鉴定提 供了有效的方法，使细菌分类鉴定工作从～般表型特 征鉴定深化为遗传特征的鉴定，从一般形态、生理生 化、血清学试验深入到细胞分子水平。布鲁氏菌的诊断 也取得了较大的进展，出现了一些新方法和新技术，本 文就此作一综述。１ＮＡ限制性内切酶图谱分析各种布鲁氏菌的基因组中均含有超变序列，这样１３可呲借助ＭＤＮＡ利用ＤＮＡ酶切图谱来检测鉴别布鲁氏菌。Ａｌｌａａｒｄｅｔ等提取纯化２３株布鲁氏菌ＤＮＡ． 其中包括１９株参考菌株，通过低酶切频率的限制性内 切酶消化、脉冲场凝胶电泳进行布鲁氏菌ＤＮＡ多态 性研究。发现５个电泳型与５个已知菌种：流产布鲁氏 菌、马尔他布鲁氏菌、猪布鲁氏菌、犬布鲁氏菌和羊布 鲁氏菌的图谱有区别。０’ｈａｒａ等采用ｌ】种不同的限制 性核酸内切酶消化３５株羊布鲁氏菌ｒ）ＮＡ．得到相同 的消化图鹬一“。资料丧明．布鲁氏菌的核酸内切酶研究 报道较多，但还不能将其作为一种合适的布鲁氏菌鉴 定方法。ＤＮＡ同源性研究细菌ＤＮＡ同源性测定包括Ｇ＋Ｃ ｍ０１％含量和ＤＮＡ—ＤＮＡ分子杂交率测定，国外一些实验室已将Ｇ＿＿ＣｍｏＩ％，ＤＮＡ杂交测定作为细菌鉴定的基本实验。Ｇ十Ｃ据ｗＨＯ报道，布鲁氏菌属ＤＮＡＩｎ０１％为５６％～５８％。１〕。这一方法对鉴定表型发生突变的分离株更 为重要。我国布病研究人员也建立了该方法，并进行了 应用。１９８８年中国药品生物制品检定所薛平等首次应 用热变性法对９株地方犬种布鲁氏菌ＤＮＡ的Ｇ＋ｃ ｍｏｌ％含量进行了测定，同时以２株国际标准株为对照。ＧｌＣ ｍ０１％值在５６．６～５８．、ｉ范围内，与文献报道３血清学检测血清学检测方法包括常规的凝集试验、补津结合 反应，以及近年来建立的高灵敏度的ＥＩ。１ｓＡ等。试管 凝集反应足我国布病诊断的法定正式试验，可以定量， 因而在判定反应强度上比虎红ｆ板凝集试验更精确。 二巯基乙醇试管凝集试验只能用于检测小分子量的免 疫球蛋白，以确定是由于注苗还是自然感染引起的抗 体滴度升高．另外．二琉基乙醇试管凝集试验是一种酸 化的非常简单的、Ｆ板凝集反应试验．能测定Ｉｇ（；抗体， 从而使其更接近于补体结合试验和琉基化合物处理血的犬种布鲁氏菌和所用的标准株所得的Ｇ十Ｃ ｍｏｌ％ 疽是一致的。各株菌经常规检定、噬菌体裂解试验、血收稿日期：２００１０８．０３作者简介：雷连成（１ ９６８一），男，内蒙包头市人．解放军军需大 学曲枷科技系讲师．项士，主要从事病原菌的快速检驯厦细菌万 方数据 耐药性克服Ｉ作。&&&&雷连成等：布鲁氏菌鉴定和检测方法研究进展清后的凝集反应。致敏红细胞凝集试验是以抗原一抗体 的特异结合为基础，以动物红细胞作中介载体，使抗 原、抗体、红细胞三者形成网状复合物．从而提高检测 灵敏度。１９９８年徐春厚等报道选用试管凝集试验、二 巯基乙醇试管凝集试验、虎红平板凝集试验、致敏红细 胞凝集试验等四种简单常用的方法来检测３２份牛布 鲁氏菌病血清抗体，并比较了四种方法的检出率、符合 率及优缺点。虎红平板凝集试验的阳性检出率最高，为 ９０．６３％，其余三法基本相似。四种检测方法的阳、阴性 符合率仅为５０％，试管凝集试验与二巯基乙醇试管凝 集试验的符合率较高，致敏红细胞凝集试验与试管凝 集试验、二巯基乙醇试管凝集试验的符合率偏低。因而 用一种检测方法判定奶牛布鲁氏菌病会出现非特异性 结果：”。Ｂａｔｒａ Ｈ９６．３％和９７．６％。通过双盲实验证实荧光偏振法还可 以区别牛型布鲁氏菌感染和疫苗株卞型布鲁氏菌１９ 免疫接种。间接ＥＬＩＳＡ和竞争ＥＩ。ＩｓＡ与荧光偏振检 测法相差无几，缓冲抗原平板凝集试验（ＢＰＡＴ）和补 体结合试验（ｃＦＴ）不如前三者。荧光偏振检测法省去 了洗涤，减少ｒ孵育时间，大量节省了检测时间、设备、 材料、试剂和费用，而且有较高的敏感度和特异性，是 最有吸引力的牛布鲁氏菌血清抗体检测方法…。４ＰＣＲ扩增９０年代以来，分子生物学技术用于布鲁氏菌的检测较多见，ＰＣＲ以其快速、准确、高效成为研究较多的 检测方法。ＢｅｔＳｙ Ｊ ＢｒｊｃＫｅｒ和ｓｈｉｆｌｅ），Ｍ Ｈａｌｕｎｇ在】９９４ 年针对牛、羊、绵羊、猪种布鲁氏菌设计不同的引物，应 用ＰＣＲ技术扩增在不同种间存在重复差异的布鲁氏 菌保守重复基因单元Ｉｓ７〕１．以区别布鲁氏菌的种。对 标准布鲁氏菌扩增１Ｓ７１１结果是：Ｂ．０ｖｌｓｂｐ；Ｂ．ｓｕｉｓ ｂｖ．１ ｚ８５ ９７６ ｂｐ；Ｂ．４９８Ｖ等采用着色金黄色葡萄球菌协同凝集试验检测４２例牛布鲁氏菌抗原，结果与流产胎儿胃内 容物中流产布鲁氏菌的分离结果极为一致。抗体包被 的着色金黄色葡萄球菌菌体对临床样品的抗原检测的 稳定性室温下长达１个月，４℃下长达３个月。而且操 作简单、快速、稳定Ｈｊ。 用ＥＬＩｓＡ检测标本中的抗原或抗体是七十年代 初创立的一项新技术。１９７６年ｃａｖｋ鲫１１等首次应用 ＥｕｓＡ检测牛布病抗体并发现其敏感性比试管凝集 试验高ｌｏ～１００倍，随后，许多学者相继应用ＥＬＩｓＡ 对人、动物的布病抗体进行了检测研究，均表明ＥＬＩｓＡ 较传统的试管凝集试验和补体结合反应敏感并且特异 性也高。杨先进等将ＥＬＩＳＡ用于出口绵羊布病的检 测．初步结果表明ＥＬＩＳＡ比常规试管凝集及补体结合 反应敏感，而且是预先将反应板包被好，洗后可置４℃ 长期保存（至少半年），使得ＥＬＩＳＡ检测样本的时间只 需４ｈ左右，缩短了检疫时问口〕。ＥＬＩＳＡ技术的成熟使 更复杂的联合检测方法得以形成，进一步提高布鲁氏 菌的检出率。１９８９年谷登峰等建立了一种Ｄｂｔ—ＥＬＩｓＡ 和单克隆抗体相结合的检测方法，先将待检血清包被ｍｅｌｉｔｅｎｓｌｓ ｂｖ．１．２，３ ７３ｌ ｂｐ；Ｂ．ａｂ。ｎｕｓ ｂｖ．１，２，４ｂｐ。而相关的放射形土壤杆菌，毛根农杆菌，豌豆根瘤菌、苜蓿根瘤菌等不能扩增出核酸 带；对照菌株支气管败血性博特氏菌和大肠杆菌扩增 结果均为阴性。对美国１０７株野外分离菌株进行检测， 能够全部鉴定，并与传统方法检测结果符合率达 １００％。说明这一方法在布鲁氏菌种的鉴定方面敏感、 可信．对美国流行种可以全部检出?”，１９９９年ＳｅｒｐｅＬ等报道了用ＰｃＲ一步法快速检测软质干酪和牛乳中 的布鲁氏菌口“。２０００年ｓｒｅｅｖａｔｓａｎ Ｓ等报道用联台 ＰｃＲ对感染牛的乳汁、鼻分泌物检测布鲁氏菌和结核菌叫。ＣＩｏｅｃｋａｅｒｔＡ等报道位于Ｉｓ７ｉｌ序列下游的２６ｂｐ基因是海洋哺乳动物的特殊标记““。ＰｃＲ在布鲁氏 菌的检测、鉴定方面越来越受到重视，吼菌体基因组和 基因组外的某些特定序列为检测基因，不仅可以确定 布鲁氏菌的种，还可以确定属。特别是近年来，ＰＣＲ和 其它检测技术（如核酸杂交）联合应用，展现ｆ良好的 前景。于硝酸纤维素膜．ｏ．２５％白明胶ｎ爵Ｈｃｉ缓冲液封闭．加入牛型５４４ Ａ抗原，洗膜后加人５４４ Ａ—ＭｃＡｂ． 再加入酶标羊抗＆～ＬＢ／Ｃ鼠１９Ｇ，加底物后进行检测。 对１００头健康牛和两个可疑奶牛场１５份奶牛血清进 行快速诊断，结果在平板凝集反应、试管凝集反应、补 体结合试验、布鲁氏菌全乳环状试验均为阴性的情况 下，ＭｃＡｂ一℃ｂｔ—ＥＵＳＡ阳性率为１４．７８％，敏感性高于 传统的试管凝集反应，符合率为８４％；特异性优于平 板凝集反应，符合率为７７％。证明该方法具有特异、敏 感、经济实用的优点ｏ〕。ＧａＵ５核酸探针检测１９９６年ＭａｔｅｒＧＭ等用ＰＣＲ扩增编码３１ ｋＤａ抗 原的基因序列，制备地高辛标记探针．鉴定布鲁氏菌 属。这一序列２２３ ｂｐ，高度保守，与布鲁氏菌免疫原性 密切相关．通过２次连续ＰＣＲ扩增．埘血清学诊断阳 性的１７例急性、３例慢性病人的血液标本检测，全部 扩增出２２３ ｂｐ的核酸序列，探针杂交也是阳性。对３０ 例健康者和９例伤寒患者的皿液标本进行扩增，全部 阴性〔１“。我国应用分子生物学技术检测布鲁氏菌的方 法直至近年来才开展起来。１９９６年工希良构建ＰＢｃ４ 重组质粒．经Ｋｐｎｌ和ＢａｍＨｌ双酶切Ｉ亘ｌ收ｎＢｒ，ａｂｏｒｔｕｓ ５４４Ａ ２２ ｋｂ的Ｄ等用荧光偏振检测法检测卞流产布鲁氏菌．并与其它血清学检测方法进行了比较。认为荧光偏 振法是检测牛布鲁氏菌最稳定的血清学方法，其敏感 度和特异性在初步评价中分别为９２．１％和９９．４％．ｂｌｉｎｄ ｓｔｕｄｙ）分别是 在后续的封闭试验中（ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ 万方数据 ＤＮＡ片段；地高辛标记制备探针。对中国１９型布鲁氏菌Ｔ＿）ＮＡ杂交出现强的杂交信号而对 ５种革兰氏阴性菌ＤＮＡ“及人白细胞ＤＮＡ不反应。 ９７年王希良利用Ｐ（、Ｒ和ＤＮＡ重组托术．均与６种布&&&&动物医学进展２００２年第２３卷第２期（总第１１８期鲁氏菌杂交阳性，证明５４４Ａ２２４ ｂｐＤＮＡ片段是６个．〔６〕播建兴．着色盆黄葡萄球菌胁同凝鬃试验检测牛布鲁氏种问高度保守的序列，为快速检测奠定了基础“…。唐 浏英用ＰｃＲ对人工感染牛种布鲁氏菌１０４Ｍ株的小 鼠、豚鼠血液进行检测，结果与血清学反应完全一致。 ２０００年Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ—Ｌａｇｏ Ｌ以流产布鲁氏菌１６ｓ ｒＲＮＡ杆菌抗原〔Ｊ〕．动物榆疫．１９８９，ｏ：’｛卜ｊ６〔７〕杨先进．马维礼，于维军用Ｅｆ。ＩｓＡ检测出Ｉ Ｉ绵羊布鲁氏 杆苗病〔Ｊ〕动物检疫．１０９０，ｊ ｌＩ）～ｌ： １８〕谷登峰，伊米提，袁燕．等抗牛布告氏杆菌单克隆抗体 斑点酶联新方法的建立和应用〔Ｊ〕中国兽医科技，１９８９，ｌｌ：２ｌ～２２．序列制备荧光核酸探针，进行全菌杂交试验。选用三种 荧光探针对所有布鲁氏菌属和变种以及９株不同的临 床分离布鲁氏菌进行杂交检测。结果用Ｂ９探针可以将 猪布鲁氏菌２．３，４，５和几乎全部布鲁氏菌属区别开。 荧光密度对不同的布鲁氏菌和其它相关微生物的检测 没有区剐。与布鲁氏菌有交叉血清学反应的１７株临床 分离非布鲁氏菌的相关菌没有出现阳性荧光信号。这 一结果表明布鲁氏菌１６Ｓ〔９〕（；ａ】ｌ Ｄ，Ｎｉｅｌｓｅｎ Ｋ，ｎ）ｒｈｅｓ Ｔ，．ｅｔ ａｌｒｃｓｃｅｎｃｅｐｏｌａｒｌｚ札ｉｏ四ｙＶ“ｄａｔｌ ｃｍ ｏ｛计Ｉｅ ｆｌｕｏ＿Ｓｅｒｎａｎｄｒｎｎｌｐａｒｌｓ帅ｔ（）（）ｃｈｃｒｌｏｚ Ｌｃａｌ８ｓｓａ”ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｃｃｔＩ（）ｎ ｎｆ魁？ｕｎｌ ａｎｔｌｂｏｄｌｃｓ ｔ（）Ｂｒｕ ｃｅｌｈ ａｈｏ九ｕｓ １ｎ ｂｌｓｏｎ〔Ｊ〕．Ｊ ｗ１１ｄ Ｉｘｓ，：０１１０，３６（３ｊ：１６９～７６．〔１０〕Ｂｒ忙ｋｅｒ Ｂ Ｊ，ＨａｌｌＩｎｇ ｓｔｕｓＭ．ｎｆｒｅ陀ｎ№ｔｌ（）ｎ（）ｆＢｒｕｃｅｌｌａ ａｂ。ｒ—ｂｖ．１，２，ａｎｄ ４ Ｂｒｕｃｅｌｈｍｃｌ】ｔ四ｓ，ＬｈｕｃｅＩｌａ ｄｖｌｓ。ａｎｄａｌ＿ｓ１“ｇｋ—ｓｔｅｐ ｎｌｃｔｈ（ｄ ｆｏｒ ｃｈＰｅｓｅ ｂｙＥｅｎｅＢｒｕｃｃｌｌａ ｓｕｉｓ ｂｖ．１ ｂｙＰ（：Ｒ〔Ｉ〕．Ｊ（矗ｃｌｍｉｆａ｝咖ｃｒｏｂｉ ０ｌｏｇｙ，ｒＲＮＡ全菌杂交技术在布鲁：１１〕１９９４，３２（儿）：２６６０～２６６６ ＆ｒｐｅ Ｉ，，Ｇａｌｌｏ氏菌检测、鉴定中是非常有价值的诊断方法口“。 虽然目前法定的检测手段仍以细菌学和免疫学检 验技术为主，但由于细菌学方法需花费１０～１５ ｄ来培 养细菌，况且生物体还需要复杂的营养以及实验室操 作存在潜在的危险性；免疫学方法在地方病地区的人 群中有一定比例的假阳性血清反应。因而伴随分子生 物学技术的发展，快速、准确、简便、高效的复合式新型 检测手段必将是重要的研究方向。Ｐ．Ｆ１ｄａⅢＮ“ｔｒａ印ｄ ｄｅｔｅｃｔｌｏｎ ｏｆ Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｃｉｆ¨ｐｏｌｙｍｃｒａｓｅ ｃｈａｍｓｐｐ．七ｎｈｓ肚一ｒｅａｃＬｌ（）【ｌ〔Ｊ：．『ＩｈｌｒｙＲｅｓ，１９９９．ｓ６（２）：３１３～３ｌ ７．〔１２〕Ｓｒｃｃｖａｎｔｓａｎ ｓ．Ｂ００ｋｏｕｔ ａｐｐｒｏａｃｈｏｒ ｔｏＪ Ｂ．Ｒｌ“ｇｐｌｓ Ｉ？，（Ｔ ａｌ－Ａ ｍｕｌｔ Ｌｐｌｅｘｒｎ（）ｌｅｃｕｌａｒ ｄｍｅｃｔｌｏｎ ｏｆＢ叫ｃｌｌａｌｎａｋ）ｒｔｕｓ ａｎｄ／ ｃｌｌｎＭｙｃｏｂａｃｔ ｃｒ【ｕｍ ｂ。ｖｌｓ ｌｎｆｅｃｔ Ｌｏｎｃ。ｌｔｔｌｃ〔Ｊ〕．ＪＭ１－ｃｒｏｂｉｏＩ，２０００，３８（７）：２６０２～１６１０〔１３〕ｃｈｃｋａｅｎｃｃｎａＡ．ＧｒａｙｏｎＭ．【Ｊｒｃｐ Ｌｎｃｔ（）＾ｎ Ｉｓ７ｌ Ｌ ｅｌｅｎｌｅｎｔ山）ｗｎｓｔＴｅａｍ ｄ １ｋ ｂｐ２６５ｐｐ．１ｓ０Ｉａｔｅｄ ｆｒｏｎｌ参考文献：〔１〕郝宗字，邓文斌．宋莲军．布鲁氏菌的分子遗传学研究进 展〔Ｊ〕．国外医学一微生物学分册，１９９２．１５（３）：１２ｌ～１２４．ｍａｒｍ四ｍｍａｋ‘ｊｇ四Ｍ３ｐ¨ｍｔｍａｒｈｒ ｏｆ ｂｒｕ—Ｊ＿Ｃ１ｌｎ ＤＩ“ＲｎＩｌｂ ＩｒｌｌｌＴｌｕｎ０１．００００，７（５）：８３ｊ～８３§『１４〕Ｍａｔａｒ Ｇ Ｍ，ＫｌｍｃＩｓ∞ｒ Ｉ Ａ．Ａｂｄｅｌｎ∞ｒ Ａ Ｍ．Ｒ。ｌｐｌｄ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｃｏｎｍｒＴｌａｔｌｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ Ｂｒｕｃｅｌ【ｏｓｌｓ ｂｙ ｐＣＲ ａｎａｌｙｓ Ｌｓ０ｎ〔２〕薛平，黄建，马丽君，等．犬种布鲁氏菌地方株的ＤＮＡ中Ｇ十ｃ ｍｏｌ％测定〔Ｊ〕．畜牧兽医学报，１９８９，２０（３）：２８４ ～２８８．ｏｆ ａ诅。ｇ。ｔ ｓｃｑｕｅｎｃｅｔｈｅ ３１Ｋｉ七ａｌｔ（】ｎ ＨⅢｃｅｌ【ａａｎｔｌｇｅｎＩ）ＮＡ〔Ｊ〕．Ｊ４７８．ｏｆ ｃｌＩｎｉｃａｌＭｌⅢ】ｂｌ（ｄ‘）ｇｙ，ｌ ９９６，３４（：）：４７７～〔３〕郭秀兰．吴从雅，张秀梅，等．基因检测技术在布鲁氏杆菌 鉴定中的应用〔Ｊ〕．中国畜禽传染病，１９８９，４９（６）：１９～３１．〔１５〕王希良朱锡华．地高辛标记乍鲁氏杆菌５４４Ａ ＤＮＡ探 针的制备及其应用〔Ｊ〕．中国卫生榆验杂志．１９９６，６（ｊ）：２５ｌ～２５４．〔４〕王晓英，黄建．制品生产用及地方疑难布鲁氏苗ｒ）ＮＡ 基因同源性的研究〔Ｊ〕．膏牧兽医学报，１９９３，２４（４）：３３ｄ～３４０．！１６〕Ｆｌｕｏ艘ｅｎｔ７１．ｈｒｎａｎｄｅｚ—Ｉ，８９０Ｉ，．ＶａｌｌｅＪｏ ＦＪ，Ｉ ｒｕ硼ａｎ。Ｉ Ｖ１ｚ∞ｌｎｏ ＮＨｒｕｃｅｌ】ａｗｈ ０ｌｅ—ｃｅｌｌ ｈｖｂｒｌｄｌｚａｔｌｏｎｗｌｔｈ ｌ ６Ｓ ｒＩ｛ＮＡ—ｔａ卜Ｌｏｇ。ｔｃｄ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｌｄｅ ｐｒ（）ｂｅｓｌｄｃｎｔｌｆｙｓｐｐｂｙ〔５〕徐春厚，吴凌．邵红，等．四种凝集试验检测牛布鲁氏 苗病血清抗体妁比较〔Ｊ〕．中国动物检疫，１９９８．１５（４）：１４～１ ５ｍ）ｗ ｃ”ｏｍｅｒｒｙ：Ｊ〕．Ｊ ｃｌｌｎ Ｍ】ｃｆ（山ｍＩ．２００【）．３８（７）：２７６８～ｚｃｄｋｇｃ。ｆ山ｔｍ毹ｓ删埘讧Ｔｅｃｈｄ。ｇ，，Ｔ—Ａｇｍ以沁Ｐ ｕ州＆ｄｍ删矾Ｕ四５“？?＾王甜，ｘ“州Ｒ?Ｂ鹌弘¨九“１ｐａｐｅｒ（１．胁以ｙ盯胁ｄＳｃ帆。勰ｄ ７Ｍ，｝舶到，Ｑ瑚Ｈ洲Ｂ髓ｒ【，艇州睹ｙ矿Ｐ，，Ａｔｃｈ”ｇ ｒ恤，ｚ?】３伽６２?（椭“．Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｒｕｃｅｌ ｌ ａ ＬＥＩ Ｌｉａｎ—ｃｈｅ“９１，Ｃ｝ⅢＮ Ｗｅｉ２Ａｂｓｔ哺ｎ：Ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｅｄ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏ“ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｂｒ叫ｅＩｌａ。ｔｈｅ【ｍｐｏ九ａｎｔｐａｔｈｏｇ蜘ｓｔｈａｔ ｉｎ—ｎｕ—ｉｎｆｅｃｔ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｏｆ ｈｖｅｓｔｏｃｋ，ｗｉｌｄｌｉｆｅ ａｎｄ ｈｕｍａｎｓ．Ｔｈｅ ｍｅｔ｝１０ｄｓ ｏ“ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｎｏｎ ｏｆ ｂｒｕｃｄｌａｍｉｎｌｙｃｌｕｄｅ Ｓｅｒｏｌｏ画ｃａｌ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ａｓｓａｙｓ，ＤＮＡ ｆｉｎｇｅｒｐｒｉｎｔｉｎｇ，Ｐ（：Ｒ ａｓｓａｙｓ，ｎｕｃｋｏｔｌ出ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ａｎｄｃｅｌＩａ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｒｅａｂｓｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｒｒｌｅｎｔ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏＩｏｇｙ． Ｋｅｖ ｗｏｒｄｓ：ｂｒｕｃｅｌｈ；ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｄｅｔｅｃｔｌｏｎｃｌｅｏｔｉｄｅ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ．Ｉｔ ｉｓ ｅｘｐｅｃｔｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｑｕｉｃｋ．ｅｘａｃｔ ａｎｄ ｓｐｅｃｉａｌ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｊｄｅｎｔｉｆｉｃａｔ】ｏｎ ａｎｄ ｄｃｆｃｃｔｌｏｎ ｏｆｂｒｕ—万方数据 &&&&布鲁氏菌鉴定和检测方法研究进展作者： 作者单位： 刊名： 英文刊名： 年，卷(期)： 被引用次数： 雷连成， 陈伟， 王兴龙 雷连成,王兴龙(解放军军需大学动物科学系,吉林 长春 130062)， 陈伟(新疆塔里木农垦大 学动物科技学院,新疆 阿拉尔 843300) 动物医学进展 PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE ) 10次参考文献(16条) 1.王希良;朱锡华 地高辛标记布鲁氏杆菌544A DNA探针的制备及其应用 .Matar G M;Khneisser I A;Abdelnoor A M Rapid laboratory confirmation of human Brucellosis by PCR analysis of a target sequence on the 31-Kilodalton Brucella antigen DNA .Cloeckaert A;Grayon M;Grepinet O An IS711 element downstream of the bp26 gene is a specific marker of brucella spp. Isolated from marine mammals .郭秀兰;吴从雅;张秀梅 基因检测技术在布鲁氏杆菌鉴定中的应用 .薛平;黄建;马丽君 犬种布氏菌地方株的DNA中G+Cmo1%测定[期刊论文]-畜牧兽医学报 .Fernandez-Lago L;Vallejo F J;Trujillano Ⅰ Vizcaino N Fluorescent whole-cell hybridization with 16S rRNA-targeted oligonucleotide probes to identify Brucella spp. by flow cytometry .Gall D;Nielsen K;Forbes L Validation of the fluorescence polarization assay and comparison to other serological assays for the detection of serum antibodies to Brucella abortus in bison[外文期刊 ] .谷登峰;伊米提;袁燕 抗牛布鲁氏杆菌单克隆抗体斑点酶联新方法的建立和应用 1989 9.杨先进;马维礼;于维军 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