酶标仪测荧光，透明板还是黑板top还是bottom(荧光,酶标仪,不确定,悬浮细胞) - 细胞实验 - 生物秀
标题: 酶标仪测荧光，透明板还是黑板top还是bottom(荧光,酶标仪,不确定,悬浮细胞)
摘要: [酶标仪测荧光，透明板还是黑板top还是bottom(荧光,酶标仪,不确定,悬浮细胞)] 用酶标仪测96孔板中的悬浮细胞荧光，用透明和黑壁透明底的板都做了，在bottom情况下，好像普通透明板和黑壁透明底的板读数差不多，而且普通透明板也没发现邻近孔荧光的干扰。现在有些不确定的因素向高手请教：1
该用普通透明板还是黑壁透明底的板？2
该用top还是bottom？（用黑壁透明底的板做了top、bottom各一次，发现bottom读数比top高很多，我是用DAPI染色的）3
最近还看到 关键词:[荧光 酶标仪 悬浮细胞 不确定]……
用测96孔板中的悬浮细胞荧光，用透明和黑壁透明底的板都做了，在bottom情况下，好像普通透明板和黑壁透明底的板读数差不多，而且普通透明板也没发现邻近孔荧光的干扰。现在有些不确定的因素向高手请教：1. 该用普通透明板还是黑壁透明底的板？2. 该用top还是bottom？（用黑壁透明底的板做了top、bottom各一次，发现bottom读数比top高很多，我是用DAPI染色的）3. 最近还看到一个贴子说是要用全黑板子做，这样就应该用top方式了吧？
回复1.用黑壁透明底或者全黑的板都是可以做的。普通透明的肯定是不行的。2.常规的是顶读的。如果荧光标记在细胞下面的话，最好是底读。而且因为是悬浮细胞，在孔里面的分布可能会因为荧光不均一而使顶读和底读数值差别大。3.全黑的板就是顶读了。建议用顶读。回复1.用黑壁透明底或者全黑的板都是可以做的。普通透明的肯定是不行的。2.常规的是顶读的。如果荧光标记在细胞下面的话，最好是底读。而且因为是悬浮细胞，在孔里面的分布可能会因为荧光不均一而使顶读和底读数值差别大。3.全黑的板就是顶读了。建议用顶读。谢谢，我当时分别测了top和bottom，结果bottom的读数要高10～15倍（360激发，469发射），下次再测一次看看。回复我有个实验问题没弄明白，知道你们懂不懂。你好 我看到你，我有个实验问题没弄明白，知道您懂不懂。我用cy3标记了核酸，用黑色的酶标板测荧光，激发是530，发射测得是550-700，但是，我的结果跟文献的不一样，文献的是 光滑的曲线，但是我的结果是折线，成锯齿状，虽然 能有个最大峰。横坐标是波长范围，纵坐标是相对荧光强度么。还有，用酶标版测得的是荧光强度还是相对荧光强度，得值范围是多少，测得数值和用石英比色皿测得结果不一样吧回复用测96孔板中的悬浮细胞荧光，用透明和黑壁透明底的板都做了，在bottom情况下，好像普通透明板和黑壁透明底的板读数差不多，而且普通透明板也没发现邻近孔荧光的干扰。现在有些不确定的因素向高手请教：1. 该用普通透明板还是黑壁透明底的板？2. 该用top还是bottom？（用黑壁透明底的板做了top、bottom各一次，发现bottom读数比top高很多，我是用DAPI染色的）3. 最近还看到一个贴子说是要用全黑板子做，这样就应该用top方式了吧？ 不知道现在你的事呀怎么样啦，最近我也想用酶标仪检测ROS，请问一下，bottom和top怎么设置啊？对应的是那个参数啊？谢谢回复 不知道现在你的事呀怎么样啦，最近我也想用酶标仪检测ROS，请问一下，bottom和top怎么设置啊？对应的是那个参数啊？谢谢我也在找荧光测ROS的方法，不知道你现在是怎么做的？回复我也要做这个
，有前辈做过的指点啊 ！！请经验分享！！
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标题: 使用荧光酶标仪究竟应该用何种96孔板最合适(酶标仪,荧光,荧光值)
摘要: [使用荧光酶标仪究竟应该用何种96孔板最合适(酶标仪,荧光,荧光值)] 使用荧光酶标仪测细胞荧光值的话最合适的应该选用何种96孔板呢？太多的选择，看花眼了。 关键词:[酶标仪 荧光 荧光值]……
使用荧光酶标仪测细胞荧光值的话最合适的应该选用何种96孔板呢？太多的选择，看花眼了。
回复一般的话你所购买的检测都有说明最匹配的耗材，认真看看说明书吧回复在promega的网站上找到如下一段话Which plates to choose for fluorescence and luminescence measurements?Opaque-walled 96- or 384-well tissue culture plates are available as white or black with solid bottoms and white or black with clear bottoms. The clear bottom plates offer the advantage of being able to examine the cells by microscopy during the course of the experiment. The primary difference between white and black plates is their reflective properties. White plates reflect light and will maximize black plates absorb light and reduce background and crosstalk. For these reasons, white plates are commonly used for luminescent assays and black plates are used for fluorescent assays. When multiplexing a luminescent and fluorescent assay, the use of a white plate would support maximum light output signal for the luminescent portion of the assay, but result in higher crosstalk and background for fluorescence. The use of a black plate in a multiplex assay would reduce fluorescent signal crosstalk and background with a reduction in luminescence.回复在promega的网站上找到如下一段话Which plates to choose for fluorescence and luminescence measurements?Opaque-walled 96- or 384-well tissue culture plates are available as white or black with solid bottoms and white or black with clear bottoms. The clear bottom plates offer the advantage of being able to examine the cells by microscopy during the course of the experiment. The primary difference between white and black plates is their reflective properties. White plates reflect light and will maximize black plates absorb light and reduce background and crosstalk. For these reasons, white plates are commonly used for luminescent assays and black plates are used for fluorescent assays. When multiplexing a luminescent and fluorescent assay, the use of a white plate would support maximum light output signal for the luminescent portion of the assay, but result in higher crosstalk and background for fluorescence. The use of a black plate in a multiplex assay would reduce fluorescent signal crosstalk and background with a reduction in luminescence.对么，不是都说了么，如果你要求不是很高的话，白的就行了，透明的也行啊回复哈尔滨地区各个研究所或者院校机构有荧光（96孔板）吗？
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