：产酯酵母液体培养基及其制备方法
本发明涉及一种产酯酵母液体培养基及其制备方法属于微生物技术领域。
产酯酵母主要属于产膜酵母或假丝酵母其中大多数为异性汉逊酵母，少数为小圆形酵母能产生以酯香为主体的香味物质。产酯酵母菌培养液怎么做在酱油及酱类生产中产生特殊的香气，是醬香的主要来源同时也可以在清香型白酒和浓香型白酒中广泛的应用，提高主体香气
对产酯酵母的培养有固态和液态两种,不管哪一种培养方式,选择适宜的培养基都是最关键的。目前在实验室和实际大生产中比较常用的培养基主要有以下几种:(1)麦芽汁培养基:主要是将大麦芽洎我糖化后的糖化液；(2)马铃薯葡萄糖培养基:主要是马铃薯浸汁与葡萄糖；(3)豆芽汁葡萄糖培养基:主要是黄豆发芽后的浸汁与葡萄糖；(4)察氏培養基:是一种化学合成培养基；(5)YPD:主要是酵母膏、蛋白胨、葡萄糖综上这些培养基在实验室进行小型试验还是可以的，但如果在生产中应用有些成分的市场价格比较昂贵，
会造成相应产品的成本比较高；另外如果经常用一种培养基对产酯酵母连续传代培养的话，会大大降低其产酯活性因此，开发一种成本低廉、营养成分又全面的天然培养基是稳定的产业化生产产酯酵母的关键。发明内容
本发明目的是提供一种成本低廉、营养成分全面且适于大规模产业化使用的天然产酯酵母液体培养基及该培养基的制备方法。
一种产酯酵母液体培养基由以下重量份的成分组成:水150-170份，玉米面 20-25份大麦芽粉5-8份，河内白曲8-10份
一种产酯酵母液体培养基的制备方法，包括如下步骤:
(2)称取20-25重量份的玉米面加入到上述58_62°C的水中搅拌均匀并加热；
(3)将水和玉米面的混合物加热至沸腾，并保持沸腾25-35分钟熬成玉米粥，然后降温至60°C -65°C ；
(4)称取8-10重量份的河内白曲作为糖化剂加入到已降温到60°C -65°c的玉米粥中搅拌均匀；
(5)称取约5-8重量份的大麦芽粉，加入到步骤(4)得到的混合物中搅拌均匀，保持温度在60°C _65°C进行糖化糖化时间为3-5小时；
(6)糖化完全后，加热至沸腾并保持沸腾25-35分钟，进行杀菌和灭酶活然后加酸调節pH至4-5 ；
(7)将步骤(6)的混合物降温至30°C，过滤分离得到糖化液和糖化混合物待温度降至20°C时，测试糖化液的白利糖度将白利糖度控制在10-12Br ix ；
(8)将步骤(7)的糖化液分装并高压蒸汽灭菌，冷却备用；糖化混合物分装到事先灭好菌的卡式罐中备用。
所述制备过程优选在夹层锅中进行以蒸汽和冷却水分别进行加热和冷却，保证受热面大热效率高，加热均匀
所述玉米面中过40目筛的占45%以上。
所述糖化是否完全的检测方法為:从步骤(5)糖化后的混合物中取适量到加有0.2ml的稀碘液的白板上进行糖化终点的判断如果碘液变蓝色，说明糖化不完全还要继续糖化，如果变红棕色说明糖化完全，可以进行下一步操作
所述步骤(6)中的酸是硫酸、盐酸。
所述步骤(7)中的过滤采用100目的棉布进行过滤
所述步骤(7)Φ白利糖度偏高时，利用蒸馏水稀释调节；偏低时加入葡萄糖进行调节。
所述高压蒸汽灭菌条件为温度115°C时间15min。
相比于现有技术本發明具有如下有益效果:
(I)原料选择含有淀粉含量较高的玉米面，经糖化后确保有充足的碳源同时又补充了一部分大麦芽粉，使得碳源、氮源以及无机盐等等成分种类更多、更全从而更有利于产酯酵母生长繁殖。
(2)制备方法中的糖化工艺采用河内白曲做糖化剂而不是糖化酶，河内白曲的酶系非常丰富像酸性蛋白酶等等，可以将玉米面中的其他成分进行部分分解增加了酵母可以利用的葡萄糖、氮源、无机鹽以及其他各种生长因子；大生产生产产酯酵母不同于实验室对酵母形态、生理生化等的研究，培养基要较贫瘠会使得保存效果更好而茬生产中要使的菌越旺盛越好。因此该工艺生产出来的培养基更适合于大生产的需要。
(3)本发明的原料选择和制作工艺成本低廉、应用效果极佳；使用该培养基30°C 摇床培养产酯酵母16-18小时即可达到旺盛期，出芽率达到最高细胞数在4.5亿/ml左右，与普通培养基相比同等培养条件下细胞数多3倍还多。
具体实施方式 以下结合具体实施例对本发明作进一步阐述
所述的产酯酵母液体培养基制作工艺步骤如下:
(I)量取150kg的水於夹层锅中，通入蒸汽加热至59°C。
(2)称取23kg40目的玉米面加入到加热至59°C的热水中。继续通蒸汽加热同时开启夹层锅上的搅拌器进行搅拌。
(3)将玉米面和水的混合物煮沸并保持沸腾28分钟，熬成玉米粥然后向夹层锅夹层中通冷却水，将锅内的玉米粥降温到60°C
(4)称取8kg的河·内白曲加入到已降温到60°C的玉米粥中搅拌均匀。
(5)称取约7kg的大麦芽粉加入到步骤(4)得到的混合物中，搅拌均匀向夹层锅夹层中缓缓通入蒸汽，并通过阀门进行控制使锅内温度保持在60°C进行糖化。
(6)糖化3.5小时后从糖化的混合物中取0.1ml到加有0.2ml的稀碘液的白板上进行糖化终点的判断，碘液变成红棕色说明糖化完全，进行下一步操作
(7)糖化完全的混合物，再继续通蒸汽煮沸34分钟进行杀菌和灭酶活，并用硫酸调pH至5
(8)將(7)处理后的混合物降温至30°C，用100目棉布过滤得到糖化液和不能经过棉布的糖化混合物待糖化液降温到20°C时，测试糖化液的白利糖度为13.5Brix糖度偏高，加入蒸懼水稀释糖度至llBrix
(9)将(8)处理后的糖化液分装到三角瓶中，盖塞包好牛皮纸后放到高压蒸汽灭菌器中，115°C15min高压灭菌，冷卻备用
(10)将(8)处理后剩余的糖化混合物分装到事先灭好菌的卡式罐中，备用
将灭菌的三角瓶糖化液放置超净工作台，无菌条件下接入斜面酵母泥2环放于 30°C、200r/min的摇床中培养18h，显微镜下测定出芽率和细胞数
同样的条件下接种酵母泥于麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基、察氏培养基和YPD培养基，同样的培养条件和培养时间测定出芽率和细胞数。
表I实施例1培养基与普通培养基的培养效率對比
权利要求 1.一种产酯酵母液体培养基其特征在于，由以下重量份的成分组成水150-170份 玉米面20-25份，大麦芽粉5-8份河内白曲8-10份。
2.一种产酯酵毋液体培养基的制备方法其特征在于，包括如下步骤Cl)量取150-170重量份的水加热至58-620C ；(2)称取20-25重量份的玉米面加入到上述58-62°C的水中，搅拌均匀并加热；(3)将水和玉米面的混合物加热至沸腾并保持沸腾25-35分钟，熬成玉米粥然后降温至 60°C -65V
；(4)称取8-10重量份的河内白曲，作为糖化剂加入到已降温到60°C-65°C的玉米粥中搅拌均匀；(5)称取约5-8重量份的大麦芽粉加入到步骤(4)得到的混合物中，搅拌均匀保持温度在60°C _65°C进行糖化，糖化时間为3-5小时；(6)糖化完全后加热至沸腾，并保持沸腾25-35分钟进行杀菌和灭酶活，然后加酸调节pH至4-5
；(7)将步骤(6)的混合物降温至30°C过滤分离得到糖化液和糖化混合物，待糖化液温度降至20°C测试糖化液的白利糖度，将白利糖度控制在10-12Brix ；(8)将步骤(7)的糖化液分装并高压蒸汽灭菌冷却备鼡；糖化混合物分装到事先灭好菌的卡式罐中，备用
3.根据权利要求2所述的产酯酵母液体培养基的制备方法，其特征在于所述制备过程茬夹层锅中进行，以蒸汽和冷却水分别进行加热和冷却
4.根据权利要求2所述的产酯酵母液体培养基的制备方法，其特征在于所述玉米面Φ过40目筛的占45%以上。
5.根据权利要求2所述的产酯酵母液体培养基的制备方法其特征在于，所述糖化是否完全的检测方法为从步骤(5)糖化后的混合物中取适量到加有O. 2ml的稀碘液的白板上进行糖化终点的判断如果碘液变蓝色，说明糖化不完全还要继续糖化，如果变红棕色 说明糖化完全，可以进行下一步操作
6.根据权利要求2所述的产酯酵母液体培养基的制备方法，其特征在于所述步骤(6) 中的酸是硫酸、盐酸。
7.根據权利要求2所述的产酯酵母液体培养基的制备方法其特征在于，所述步骤(7) 中的过滤采用100目的棉布进行过滤
8.根据权利要求2所述的产酯酵毋液体培养基的制备方法，其特征在于所述步骤(7) 中白利糖度偏高时，利用蒸馏水稀释调节；偏低时加入葡萄糖进行调节。
9.根据权利要求2所述的产酯酵母液体培养基的制备方法其特征在于，所述高压蒸汽灭菌条件为温度115°C时间15min。
本发明涉及一种产酯酵母液体培养基的忣其制作工艺属于微生物技术领域。先取水150-170重量份于夹层锅中通入蒸汽加热到58-62℃，再加入玉米面20-25重量份(玉米面要求过40目筛的占45%以上)繼续蒸汽加热，并用搅拌器搅拌煮沸，保持沸腾25-35分钟然后降温到60℃-65℃，加入河内白曲8-10重量份大麦芽粉5-8重量份，于60℃-65℃保持3-5h糖化最後用稀碘液判断糖化终点。煮沸半小时杀菌灭酶用硫酸调节pH4-5，降温到30℃左右取出一部分用白细布过滤后即成糖化液，糖度控制在10-12Brix然後分装到三角瓶中，包好后在高压蒸汽灭菌器中115℃、15min灭菌冷却备用。其余的为糖化醪分装到事先灭菌的卡式罐中，备用
赵纪文, 许玲, 胥伟宏, 信春晖, 王增军, 王凤丽, 韩睛睛 申请人:山东扳倒井股份有限公司
