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水产同行圈
内容摘要：
　芽孢杆菌属(Bacillus)是一类好氧或兼型厌氧、产生抗
逆性内生孢子的杆状细菌，多数为腐生菌，主要分布于土
壤、植物体表面及水体中，主要有蜡质芽孢杆菌、地衣芽孢
杆菌、枯草芽孢杆菌等。由于它们能够产生对热、紫外线、
电磁辐射和某些化学药品有很强抗性的芽孢，因此能忍受多
种不良环境。芽孢杆菌中存在很多特殊功能的菌株，在工
业、农业、医学、军事和科学研究中有广泛的应用价值，有
的可以在高渗、高酸、高碱、高温、高寒的环境下良好生
长，有较大的生态学价值；有的可分泌多种酶类，应用于酶
制剂工业；有的可作为多种蛋白基因表达受体，在基因工程
和生物学研究领域中有较高的应用价值；除极个别的菌种
外，多数菌种与动、植物关系密切并与其形成良好的共生体
系，应用于益生菌制剂、微生物肥料的生产
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文献分类猪
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请问针对枯草芽孢杆菌表达系统商业化的载体有哪些啊？
要做一种基因在枯草芽孢杆菌表达系统中表达，请问针对枯草芽孢杆菌表达系统商业化的载体有哪些啊？用大肠杆菌的载体pET28a能不能行啊？各位前辈指导一下
PHT43&&PHT01&&可以的 : Originally posted by zheng1991 at
PHT43&&PHT01&&可以的 大侠 你用过之后可以表达吗？还是有什么书可以参考下 建议楼主看看xiaozhou zhang的文章以及德国做pDNH10的作者以及sl wong教授。会有帮助的。切勿用PET28a，是不可以做出来的。 PHT01，08，09，10，43貌似都可以，具体楼主可以去搜搜枯草芽孢杆菌表达手册，有相关内容。 : Originally posted by huangrui1988 at
建议楼主看看xiaozhou zhang的文章以及德国做pDNH10的作者以及sl wong教授。会有帮助的。切勿用PET28a，是不可以做出来的。 张晓舟的论文已经下载来看看了，其他这两位的论文楼主可不可以给发一份啊，邮箱,谢谢啦！ 载体：pHT01& & pHT43
菌株：枯草杆菌WB800、WB600、168
以上我们公司都能提供，有需要请联系。枯草芽孢杆菌的固定化及其净水效果的研究--《华中农业大学》2008年硕士论文
枯草芽孢杆菌的固定化及其净水效果的研究
【摘要】：
本课题是探索枯草芽孢杆菌的固定化方法以及其对人工模拟污水净化效果的研究。所取得的主要结果如下:
1.运用麦麸对枯草芽孢杆菌进行固体培养,得到枯草芽孢杆菌固体菌剂,活菌数为3×10~(10)cfu/g。使用聚丙烯纤维无纺布对固体菌剂进行包埋,得到包埋菌剂。
2.对包埋菌剂中枯草芽孢杆菌的释放规律进行试验。枯草芽孢杆菌起始菌数为80亿,经过6-8h后水体中总菌数与布包中留有菌的总和菌量达到最大,约360亿,为起始菌量的4.5倍。随后布包与水体中的菌数缓慢减少,在48h后逐渐趋于稳定,整个系统中总菌量维持在140亿左右,然后缓慢下降,5天以后,系统总菌数为80亿,相当于起始添加的菌量。包埋菌剂具有很好的缓释菌体的效果,延长菌体的作用时间。
3.通过人工模拟污水试验对包埋菌剂与非包埋菌剂进行了净水效果的对比研究,结果表明:增氧条件下,对低浓度模拟污水进行实验,发现各个不同投菌浓度间没有很大的差异,包埋菌剂与非包埋菌剂间的差别也不大;高浓度模拟污水实验发现,7.5×10~5 cfu/ml的投菌浓度的净水效果相对较好,且包埋菌剂的水体COD_(Mn)的去除效果较非包埋菌剂有优势;连续补充有机质的水体实验表明,包埋菌剂较非包埋菌剂可以更持久地发挥净水作用,降解有机质的速度也较快;静置条件下,包埋菌剂的净水效果明显好于非包埋菌剂。包埋菌剂48h后COD_(Mn)去除率可达75.22%,而直接投放非包埋菌剂受到溶氧较大限制,48h后COD_(Mn)去除率仅为40.21%。
4.为了给枯草芽孢杆菌挂膜实验提供依据,对其发酵产多糖进行了优化实验。实验表明,3%蔗糖,1%硫酸铵,0.5%的牛肉膏配比产多糖量最多,产多糖可达2mg/L以上,枯草芽孢杆菌OD_(600)可达3.16。
【关键词】：
【学位授予单位】：华中农业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2008【分类号】：X703【目录】：
ABSTRACT7-9
缩略名词表9-10
1 前言10-24
1.1 研究背景10-13
1.1.1 我国湖库、河流污染现状10-11
1.1.2 养殖水体环境污染状况11-13
1.2 微生物净水技术在水环境治理上应用13-15
1.2.1 在湖泊景观水治理上的应用13-14
1.2.2 在水产养殖环境控制上的应用14-15
1.2.3 微生物净水技术特点和优势15
1.2.4 微生物净水技术在实际应用中存在问题15
1.3 微生物固定化技术15-22
1.3.1 微生物固定化载体16-17
1.3.2 微生物固定化方法17-18
1.3.3 水体净化中常用的微生物固定化方法18-20
1.3.4 固定化微生物技术在水体净化中的应用实例20-21
1.3.5 微生物固定化技术存在的问题及展望21-22
1.4 研究目的及意义22-24
2 实验材料和方法24-30
2.1 实验材料24-26
2.1.1 主要仪器设备24
2.1.2 实验菌株及材料24
2.1.3 试剂24-25
2.1.4 培养基25
2.1.5 实验水样25-26
2.2 实验方法26-30
2.2.1 枯草芽孢杆菌包埋菌剂的制备26
2.2.2 包埋菌剂中菌体的释放规律试验26
2.2.3 增氧条件下包埋菌剂与非包埋菌剂净水效果对比试验26-27
2.2.4 静置条件下包埋菌剂与非包埋菌剂净水效果对比试验27
2.2.5 发酵产多糖培养基优化实验27-30
3 结果与分析30-54
3.1 枯草芽孢杆菌包埋菌剂30
3.2 包埋菌剂枯草芽孢杆菌的释放规律30-31
3.3 增氧条件下包埋菌剂与非包埋菌剂净水效果对比结果31-46
3.3.1 高浓度模拟污水净水效果对比结果31-38
3.3.2 低浓度模拟污水净水效果对比结果38-41
3.3.3 连续添加有机质净水效果对比结果41-46
3.4 静置条件下包埋菌剂与非包埋菌剂净水效果对比结果46-49
3.4.1 对高锰酸盐指数(Permanganate Index，COD_(Mn))的去除效果46-48
3.4.2 溶氧值的变化48
3.4.3 pH值的变化48-49
3.5 多糖的标准曲线49-50
3.6 发酵产多糖培养基配比的优化结果50-54
3.6.1 枯草芽孢杆菌发酵产多糖有机质组分优化预实验结果50
3.6.2 枯草芽孢杆菌发酵产多糖培养基优化50-52
3.6.3 蔗糖与硫酸铵配比产多糖优化结果52
3.6.4 添加有机质提高菌量优化结果52-54
4 小结54-56
4.1 聚丙烯无纺布包埋方法54-55
4.1.1 包埋菌剂的包埋效率54
4.1.2 包埋菌剂对水质的净化效果54-55
4.2 枯草芽孢杆菌发酵产多糖的优化结果55-56
5 讨论56-58
5.1 聚丙烯纤维无纺布包埋菌剂的优势及特点56
5.2 枯草芽孢杆菌发酵产胞外多糖培养基配比优化56-57
5.3 对实验方法的讨论57-58
参考文献58-62
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芽孢杆菌对水产养殖环境的净化作用
发布时间： 12:52:46　　来源：天津海福特 　　编辑：秋水　　
核心提示：近年来,随着水产养殖业的蓬勃发展,养殖品种的老化和退化,水产动物疾病的频繁发生,养殖水体环境的日益恶化,这三大问题已成为阻碍我国水产养殖业发展的瓶颈。尤其是以投饵为主的养殖模式,残饵、粪便
近年来,随着水产养殖业的蓬勃发展,养殖品种的老化和退化,水产动物疾病的频繁发生,养殖水体环境的日益恶化,这三大问题已成为阻碍我国水产养殖业发展的瓶颈。尤其是以投饵为主的养殖模式,残饵、粪便、死亡生物的残体、养殖池塘底物的沉积物、氮(N)、磷(P)等富营养因子排入水体,养殖水体中的化学需要量(COD)、生物需要量(BOD)严重超标,使水体日益严重恶化,水产动物疾病频繁发生。据报道,人工投饵输入虾池的氮占总输入的氮的90%左右,其中仅有19%转化为虾体内的氮,其余的62%~68%的氮积累于虾池底部淤泥中,此外有8%~12%以悬浮颗粒氮溶解有机氮、溶解无机氮等形式存于池水中,这造成池塘水质的严重恶化。改善水生养殖环境,实行生物修复势在必行。 芽孢杆菌作为一种简易的细菌(真细菌),是土壤中的优势种群,能强烈地分解碳系、氮系、磷系、硫系污染物,分解蛋白质和复杂多糖,对水溶性有机物分解也有重要的作用,同时可以与养殖环境中的有害藻类及水产致病菌竞争,形成优势种群,抑制有害藻类及水产致病菌。由于它的特性与功能优于光合细菌而有望成为光和细菌的替代品,已成为当前国际净水界的研究热点。& 芽孢杆菌的种类: 目前,可利用的芽孢杆菌有:枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、缓慢芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、东洋芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、芽孢乳杆菌、丁酸梭等。 芽孢杆菌对水质净化的作用机理： 芽孢杆菌类净水微生物的使用,使养殖者在不中断养殖过程的情况下,清除长时间残留于养殖水域底部废物,尤其是老虾池底部积累的大量残余饵料、排泄废物、动植物残体以及有害气体(氨,硫化氢等),使之先分解为小分子(多肽、高级脂肪酸等),后分解为更小分子有机物&(氨基酸、低级脂肪酸、单糖、环烃等),最终分解为二氧化碳、硝酸盐、硫酸盐等,有效降低了水中的COD、BOD,使水体中的氨氮(NH4+-N)与亚硝酸氮(NO2--N)、硫化物浓度降低,从而有效地改善水质。同时还能为以单细胞藻类为主的浮游植物提供营养物质,促进繁殖。这些浮游植物的光合作用,又为池内底栖水产动物的呼吸、有机物的分解提供氧气,从而形成一个良性生态循环。 由于芽孢杆菌大量繁殖,在池内形成优势种群,可抑制病原微生物的繁殖,减少疾病发生。& 芽孢杆菌对水生生态系统作用效果 3.1去碳功能& 芽孢杆菌具有丰富的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、脱氢酶、脱羧酶、氧化酶等能强烈的分解碳系污染物,分解蛋白质和复杂多糖,对水溶性有机物分解也有重要的作用。 养殖池塘内的悬浮物(简称“絮团”)和底泥严重恶化了水环境,引起动物发病。其中悬浮物由有机碎屑、细菌、藻类和矿物质等细微颗粒组成的胶粘状物;底泥由有机碎屑、细菌和藻类组成,含纤维素15%~60%,半纤维素10%~30%,木素5%~30%和蛋白质2%~15%,还含有可溶性物质如糖、氨基糖、有机酸和氨基酸,占干物质重的10%。而芽孢杆菌通过其酶的作用,能分解悬浮物和底泥,从而维持水生生态环境平衡。把芽孢杆菌(菌液浓度≥1010个/g)投入养殖池,能降低水中COD、BOD,有效改善水质和周围环境。 & 3.2&去氮、去硫功能 高密度集约化养殖给养殖池塘生态环境带来了严重的污染,研究表明,池塘每生产1吨虹鳟池塘总磷和总氮的负载分别为25.6kg和124.2kg。 过量的N、P排入水体引起池塘富营养化,在池塘内也易形成对水产动物有毒性的NH4+-N、H2S,影响动物的生长,甚至死亡。而芽孢杆菌可利用其丰富的酶,强烈分解氮系、硫系污染物,净化养殖水体。应用芽孢杆菌为主导菌的复合微生态制剂,含活菌数为109个/g,首次用量为1.5~5.0mg/L,结果增加溶解氧(DO),降低NH4+-N、NO2--N及H2S,改善了养殖环境,池水和底沙中的异养细菌数量明显增加。& 3.3&分解淤泥 用芽孢杆菌为主的微生物复合制剂,其活菌数为109个/g,用量为1.5~4.5&mL/m3,经1个月试验表明,池底淤泥被分解了3~125px。利用芽孢杆菌制剂改良底质的应用实验结果表明,有机碳未出现积累,芽孢杆菌降解有机碳效果显著;总氮出现积累现象,处理组与实验组之间差异不显著;碳氮比在底质中呈下降趋势。 & 3.4&絮凝作用& 芽孢杆菌有很好的絮凝作用,且复合芽孢菌株比单株芽孢杆菌的絮凝效果好。 这种絮凝作用可以将水体中的有机碎屑互相粘连在一起,构成菌胶团,担负氧化分解的任务,将有机物结合成絮状,使重金属离子、P元素沉淀,水体净化。& 3.5&硝化作用 NO3-在芽孢杆菌作用下,经NO2-,NO,N2O被还原为N2,即芽孢杆菌是好氧菌和兼性厌氧菌,以分子氧为载体,在供氧不充分的时间与空间,可以利用硝酸盐为最终电子载体产生NO2--N和N2,而起反硝化作用,将硝酸盐移出系统外,提高pH。& 总的来说,芽孢杆菌具有强烈的分解碳系、氮系、磷系、硫系污染物,分解蛋白质、复杂多糖、水溶性有机物的能力,已被广泛应用。
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枯草杆菌有什么作用
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枯草芽孢杆菌菌体在生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用；枯草芽孢杆菌能迅速消耗消化道内环境中的游离氧，形成肠道低氧环境，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病菌的生长；枯草芽孢杆菌能刺激动物免疫器官的生长发育，激活淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫和体液免疫功能，提高群体免疫力；枯草芽孢杆菌菌体能自身合成消化性酶类，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等，在消化道中与内源酶共同发挥作用，提高饲料消化率；枯草芽孢杆菌能合成多种维生素，提高动物体内干扰素和巨噬细胞的活性。产品特点
富含多种消化性酶类，如蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶等；富含多种氨基酸和维生素物质；孢子进入消化道后的复活率几乎达100%；耐高温及温度变化、耐挤压，能够满足各种饲料加工的要求。产品性能乳猪：降低乳猪黄、白痢及其他肠道细菌性腹泻的发生率，提高乳猪成活率；促进乳猪免疫器官的发育，提高乳猪的免疫力及抗病力；改善和稳定乳猪肠道菌群环境，增强乳猪对环境应激的抵抗力；保护肠粘膜及肠绒毛正常发育，提高养分吸收能力；促进乳猪生长，提高乳猪的断奶体重；净化乳猪生长环境，减少发病诱因；提高中、大猪在停药期或运转时的抗应激能力。鸡：
减少鸡肠道疾病的发生，特别是对防治腹泻和菌痢具有良好的作用，对沙门氏菌的防治效果明显；提高饲料转化利用率，降低生产成本；提高蛋鸡产蛋率，提高肉鸡的日增重；提高动物产品质量，减少鸡蛋中的腐败硫化物的数量，对种鸡生产和种蛋孵化有利；净化养殖环境，减少发病诱因。反刍动物：
有效调节胃肠道的微生态平衡，减少幼龄反刍动物腹泻的发生；缓冲瘤胃PH值，加快微生物蛋白的合成，增强瘤胃微生物的消化功能，提高氨的利用率；提高奶牛、奶羊的产奶量和乳脂率，改善奶的品质，延长产奶高峰期，降低奶牛乳房炎等疾病的发生率；提高肉牛采食量，促进生长，提高日增重；优化生态环境，降低动物舍内氨气、硫化氢等有害气体的浓度，减少粪便中有机物的排泄。水产动物：
提高出苗率，减少疾病的发生，增加单位水体亩产量，并可改善水质环境；提高生产效率，降低铒料系数；能够改善水生动物肠道微生物区系，增强机体抗病力；净化水质，减少发病诱因。
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