髓核样细胞与温敏型支架复合培养的探索研究--《第四军医大学》2010年硕士论文
髓核样细胞与温敏型支架复合培养的探索研究
【摘要】：
椎间盘(Intervertebral Disc, IVD)由软骨终板、髓核以及纤维环组成,髓核(Nucleus pulposus)是椎间盘结构与功能的核心,包含髓核细胞和细胞外基质。人类椎间盘在生命中“第二个十年”就开始退变,出现细胞凋亡、基质成分改变、纤维环松弛等病理变化。而椎间盘退变是一系列脊柱退行性疾病发生的前提和始动环节,特别是下腰痛发生的首要因素。如若可以控制椎间盘退变进程,就可以从一方面防止这些疾病的发生。组织工程技术是利用种子细胞结合载体、支架材料重建组织器官、修复病变的方法,这一技术的成功应用,可以从根本上解决椎间盘退变的问题。目前多选用间充质干细胞作为种子细胞,在体外以适宜的方法诱导其分化为髓核样细胞。复合生长因子诱导以及细胞共培养诱导在业界均有一定研究,但二者对于脂肪干细胞向髓核样细胞分化的效果有何不同,尚需探索。另外,本实验把处于软骨组织工程领域内研究热点的壳聚糖基可注射支架与诱导后的髓核样细胞复合,评估其是否具备良好的相容性并维持髓核样细胞的分化表型、保证正常的细胞外基质分泌,为“可注射支架复合髓核样细胞微创修复退变椎间盘”这一临床应用构想进行体外实验。
实验一选取2月龄新西兰兔,从肩胛间脂肪组织提取脂肪干细胞并提取髓核细胞,分别进行体外单层培养扩增,倒置显微镜观察细胞形态;脂肪干细胞传3代后,流式细胞术鉴定细胞表面抗原;将3代脂肪干细胞分为两组,一组以成髓核诱导培养基诱导分化2周,另一组与髓核细胞在Transwell培养板中共培养2周,比较两组细胞在蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达水平上的差异。
实验二以兔脂肪干细胞作为种子细胞,采用实验一中成髓核诱导培养基诱导为髓核样细胞;以氯化壳聚糖(C)与β-甘油磷酸钠(GP)构建温敏型可注射支架。将细胞与支架混合,37℃成胶后,在成髓核诱导培养基中培养3周,通过AO-PI染色法和扫描电镜观测细胞存活情况,PR-PCR检测蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达水平。
结果证明,生长因子诱导与共培养诱导对细胞在蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达水平上均无统计学差异,仅蛋白聚糖表达水平前者略高;髓核样细胞在温敏型壳聚糖支架上生存状况良好,培养3周后细胞功能状态(蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA表达水平)较复合培养前的髓核样细胞有一定提高,其蛋白聚糖表达水平差异有统计学意义。
【关键词】：
【学位授予单位】：第四军医大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R329【目录】：
缩略语表5-6
中文摘要6-8
英文摘要8-11
文献回顾12-24
实验部分24-42
实验一 兔脂肪干细胞向髓核细胞样分化的诱导条件探索24-35
1. 材料25-26
2. 方法26-29
3. 结果29-32
4. 讨论32-35
实验二 诱导后脂肪干细胞与温敏型壳聚糖支架相容性研究35-42
1. 材料35-36
2. 方法36-37
3. 结果37-39
4. 讨论39-42
参考文献43-48
个人简历和研究成果48-49
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京公网安备74号后侧入路在胫骨平台后侧骨折11例中应用--《交通医学》2011年06期
后侧入路在胫骨平台后侧骨折11例中应用
【摘要】：目的:探讨采用后侧手术入路治疗胫骨平台后侧骨折的临床效果。方法:收治胫骨平台后侧骨折11例,后外3例,后内6例,后内、后外广泛骨折2例。外侧髁后外侧骨折采用后外侧倒L形切口,内侧髁后侧骨折、外侧髁后内侧及内外侧髁后侧广泛骨折采用后内侧倒"L"形切口,直视下解剖复位骨折后钢板内固定。结果:随访时间12～28个月,平均16.5个月。骨折愈合12～19周,平均15.2周。完全负重12～26周,平均16.5周。术后出现下肢深静脉血栓形成1例经抗凝、活血化瘀治疗1周后恢复。术后24周采用美国特种外科医院(HSS)评分82～90分,平均为85.3分。结论:采用膝关节后侧入路治疗胫骨平台后侧骨折,具有手术野暴露清楚、复位准确、内固定安置方便、临床疗效好,并发症少等优点。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R687.3【正文快照】：
随着交通事故、工伤事故等频发,胫骨平台骨折日益增多。高能量损伤导致的复杂胫骨平台骨折所占比例相应增加,其中单纯胫骨平台后侧骨折并不少见。本院2007年3月—2009年10月共收治胫骨平台后侧骨折11例,采用膝关节后侧入路作切开复位内固定,取得了较满意的疗效,现报告如下。1
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京公网安备74号自身重量悬吊牵引治疗腰椎间盘突出症的临床研究--《黑龙江中医药大学》2010年硕士论文
自身重量悬吊牵引治疗腰椎间盘突出症的临床研究
【摘要】：
目的:观察自身重量悬吊牵引在初期腰椎间盘突出症治疗中的临床疗效。
方法:选择符合纳入标准的LDH患者60例为研究对象,年龄27~56岁,经临床及影象学检查诊断为腰椎间盘突出症者,随机分为治疗组(直立位自身重量悬吊牵引治疗)和对照组(平卧位电脑动力牵引治疗),每组各30例。每组病人都经过两个疗程(四周)的治疗,并根据各组病例治疗前后的症状、体征变化进行评分、比较,以评价自身重量悬吊牵引治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。
结果:两组患者在经过四周的治疗后疗效满意。其中治疗组治愈1例,显效15例,好转12例,无效2例(有效率为90.04%);对照组治愈2例,显效16例,好转11例,无效1例;两组治疗腰椎间盘突出症的疗效无明显差异。病程在半年内者的疗效要高于病程在半年以上。
结论:自身重量悬吊牵引(直立位)治疗腰椎间盘突出症是简单易行,安全可靠,并有疗效确切,锻炼腰背肌的优点。
【关键词】：
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R681.5【目录】：
缩略语表6-7
中文摘要7-8
ABSTRACT8-9
第一部分 文献综述10-27
1.祖国医学对腰椎间盘突出症的认识10-12
1.1 前人对腰间盘突出症的认识10-11
1.2 中医药对腰间盘突出症的分型11-12
2 现代医学对 LDH 的认识12-22
2.1 腰椎间盘的解剖与解剖生理12-14
2.2 腰椎间盘的病理与病理生理14-15
2.3 病因学说研究15-16
2.4 病理学及病理分型16-17
2.5 临床分型17
2.6 症状与体征17-19
2.7 特殊检查19-20
2.8 影像学检查20-21
2.9 其他特殊检查21-22
3 手术治疗22-24
3.1 传统手术治疗的方式22-23
3.2 微创介入治疗23-24
4、非手术治疗方法24-27
4.1 卧床休息24
4.2 牵引治疗24
4.3 手法治疗24-25
4.4 针灸治疗25
4.5 物理治疗25
4.6 药物治疗25
4.7 封闭治疗25-26
4.8 运动疗法26-27
第二部分 临床资料27-29
1 治疗组与对照组的性别及年龄构成分布27
2 治疗组与对照组患者病程分布27
3 治疗组与对照组患者突出椎间盘节段数与其分布27-28
4 治疗组与对照组牵引前后各节段椎间隙测量值分布28
5 治疗组与对照组治疗前疾病严重程度的比较28-29
第三部分 研究方法29-34
1 病案诊断及纳入，排除标准29-30
1.2 病例纳入标准29
1.3 病例排除标准29-30
2 临床疗效观察30-32
2.1 观察项目30-32
2.2 病情程度评定标准32
2.3 疗效评定标准32
3 治疗方法32-33
4 影像学指标33
5 统计学方法33-34
第四部分 研究结果34-35
1 治疗组与对照组疗效比较34
2 治疗组与对照组 VAS 评分比较34
3 治疗组与对照组 JOA 评分比较34
4 治疗组与对照组治疗后疗效率的比较34-35
第五部分 讨论35-43
1 祖国医学对腰间盘突出症发病的认识35
2 现代医学对腰间盘突出症发病的认识35-37
2.1 疼痛机制的研究35-37
2.2 机械刺激学说37
2.3 炎症刺激学说37
3 与自身重量悬吊牵引治疗作用相关问题讨论37-43
3.1 腰椎牵引的作用机理37-38
3.2 牵引重量与腰椎间隙增大的关系38-39
3.3 自身重量悬吊牵引与平卧位动力持续牵引的比较39-40
3.4 自身重量悬吊牵引的力学研究40
3.5 自身重量悬吊牵引治疗 LDH 的适应症及注意事项40-41
3.6 腰背肌锻炼在腰椎间盘突出症治疗中的意义41-43
参考文献45-51
个人简介51-52
详细摘要52-53
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